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第 七 章 原核生物基因表达调控(Control of Gene Expression) 第一节 概 述 一、基因表达的概念(gene expression) : 是指原核生物和真核生物基因组中特定的结构基因所携带的遗传信息,经过转录、翻译等一系列过程,合成具有特定的生物学功能的各种蛋白质。表现出特定的生物学效应的全过程。 二、基因表达调控的概念 三、基因表达调控的目的 适应环境、维持生长和增殖; 维持个体发育与分化。 四、基因表达的调控水平: 第二节 原核生物基因表达的调控(Control of Prokaryotic Gene Exepression ) 原核生物基因表达调控主要是转录水平的调控(control of transcription) 其次是翻译水平的调控(control of translation) 原核生物转录水平的调控单位:操纵子(operon) 一、操纵子模型的提出 —莫洛(Monod)和雅各布(Jacob)获1965年诺贝尔生理学和医学奖 Discovery of Operon 1940年, Monod发现:细菌在含葡萄糖和乳糖的培养基上生长时,细菌先利用葡萄糖,葡萄糖用完后,才利用乳糖;在糖源转变期,细菌的生长会出现停顿。即产生“二次生长曲线”。 即细菌在含葡萄糖的培养基中生长良好,在只含乳糖的培养基中开始时生长不好,后来生长好。在含葡萄糖的培养基中生长时,每个细胞只有几个β-半乳糖苷酶,但若转移到乳糖的培养基中,几分钟后,每个细胞内可产生3000个β-半乳糖苷酶分子。 1951年,Monod与Jacob合作,发现两对基因: Z基因:与合成β-半乳糖苷酶有关; I基因:决定细胞对诱导物的反应。 I基因决定阻遏物的合成,当阻遏物存在时,酶无法合成,只有有诱导物存在,才能去掉该阻遏物。 结构基因旁有开关基因(即操纵基因),阻遏物通过与开关基因的结合,控制结构基因的表达。 这类基因被称为可诱导基因,这类酶称为可诱导酶,这个生化过程称为酶的诱导合成。 操纵子结构 操纵子(operon): 结构基因(structural gene)、启动子(promoter,P)和操纵基因(operator,O)。 阻遏物基因(inhibitor,i),产生阻遏物。(repressor)。 二、原核生物基因转录水平调控 (一)转录水平调控类型: 1、负转录调控:调节基因的产物是阻遏蛋白,起着阻止结构基因转录的作用。 根据其作用特征又可分为负控诱导和负控阻遏作用。 在负控诱导系统中,阻遏蛋白不与效应物结合时,结构基因不转录;在负控阻遏系统中,阻遏蛋白与效应物结合时,结构基因不转录。阻遏蛋白作用的部位是操纵区。 2、正转录调控:调节基因的产物是激活蛋白,起着促进结构基因转录的作用。 根据其作用特征又可分为正控诱导和正控阻遏作用。 在正控诱导系统中,效应物分子的存在,使激活蛋白处于活性状态;在正控阻遏系统中,效应物分子的存在,使激活蛋白处于非活性状态。 lac (二)负转录调控1、lac操纵子 (1)阻遏蛋白的负性调节—酶合成的诱导: 无乳糖(no lactose): lac操纵子处于阻遏状态(repression),即这类基因平时都是处于关闭状态; 有乳糖(presence of lactose):lac操纵子即可被诱导(derepression,induction),即这类基因由平时的关闭状态转变为工作状态。 诱导剂(inducer): 别乳糖、IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)和巯甲基半乳糖苷。 IPTG(异丙基硫代半乳糖苷) 极强的诱导剂 乳糖操纵子(lac operon)的调控方式 (2)CAP的正性调节(Positive Control of CAP) CAP(catabolite activator protein):分解代谢产物激活物蛋白或分解代谢基因激活蛋白,现称为cAMP受体蛋白,是同二聚体。 当它特异地结合在启动子上时,能促进RNA聚合酶与启动子结合,促进转录。但游离的CAP是不能与启动子结合,必须在细胞内有足够的CAP时, CAP首先与cAMP形成复合物,此复合物才能与启动子结合。葡萄糖的降解产物能降低细胞内cAMP的含量,因而当向乳糖培养基中加入葡萄糖时,造成cAMP浓度降低,CAP便不能结合在启动子上,此时,即使有乳糖存在,已解除了对操纵基因的阻遏,也不能进行转录。 乳糖操纵子的降解物阻遏 协调调节(coordinate regulation) 负性调节与正性调节协调合作 阻遏蛋白封闭转录时,CAP不发挥作用 如没有CAP加强转录,即使阻遏蛋白从P上解聚仍无转录活性 ☆葡萄糖/乳
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