课件：食品中有害物质的检测考试复习副本.ppt

* 中毒之潜伏期与摄取的毒素量有关，一般约为数分钟至数小时内。 神经性贝类毒素的毒理是:与麻痹性毒素相似 ,作用于钠通道 ,作用位点与石房蛤毒素不同 ,引起钠通道维持开放状态 ,从而引起钠离子内流 ,造成神经细胞膜去极化。 目前 ,对新鲜的、 冷冻的或罐装制品的牡蛎、 蛤类和贻贝的神经性贝类毒素最大允许限量为 20MU/ 100g * 国家质量监督检验检疫总局在 2001 年发布的 GB 18421- 2001《海洋生物质量》标准,规定麻痹性贝毒素( PSP) 含量≤0.8mg/kg。 国家质量监督检验检疫总局在 2001 年发布的 GB 18406.4- 2001 《农产品安全质量无公害水产品的安全要求》标准, 规定麻痹性贝毒素( PSP) 含量不得超过 80 微克 /100克, 腹泻性贝毒素( DSP) 含量不得超过 80微克 /100 克。 农业部 2006 年发布的 NY/T5073- 2006《无公害食品 水产品中有毒有害物质限量》标准中规定麻痹性贝毒素( PSP) 含量不得超过 400MU/100 克( 贝类) , 腹泻性贝毒素( DSP) MU/ 克为不得捡出( 贝类) 。 * 由于贝类毒素的成分复杂，制约了对它们的深入研究。随着检测方法的不断提高，我们期待有更简便、快速和灵敏的方法进行贝毒检测，保障人类食用贝类的安全 * 小鼠生物检验法是将贝类毒素的提取物进行适当的稀释后 ,对小白鼠进行腹腔注射 ,并计算平均致死时间。根据 Sommer 表 ,查出相应的 MU (给小白鼠腹腔注射毒素的系列稀释液 ,然后计算每只 20g 小白鼠的剂量作为 1 个死亡时间 ,以 15min 内杀死 1 只鼠单位 Mouse unit ,MU 来表示毒性的大小 ,换算成 MU/ 100g贝肉) 。 小鼠生物测定法已被 AOAC(美国公职分析家协会)作为国际海产品贸易中贝类麻痹性毒素的测定方法。但该方法的缺点是由于小鼠的大小以及小鼠个体情况的不同 ,因此造成灵敏度不高 ,偏差较大。而且存在实验小鼠用量大以及哺乳动物费用增加的缺陷。同时操作繁琐 ,以及用该法测定高毒性贝类样品时的变异性较高的缺陷 家蝇生物检验法、蝗虫生物检验法、神经细胞生物检验法（PSP\ASP\DSP ） * 许多实验已证明麻痹性贝类毒素的致病机理是通过对细胞钠通道的阻断，造成神经系统传输障碍而产生麻痹作用。在AOAC的赞助下，进行了用小鼠的验成神经细胞瘤检麻痹性贝类毒素存在的实验。 实验原理如下:当加入乌本苷这种物质时 ,可增加钠的流入 ,此时小鼠的成神经细胞瘤扩张并最后溶解暴露在藜芦丁中。但在麻痹性贝类毒素存在时 ,这两种物质的作用可得到抑制 ,麻痹性贝类毒素通过对细胞钠通道的阻断 ,可使细胞形态保持完整 腹泻性贝类毒素的细胞检验法是建立在肝细胞形态的变化基础上的 早期用显微镜计数活细胞以检测PSP的含量，后采用染色法用酶标仪测定，四甲基偶氮唑蓝（MTT）代替结晶紫，效果更好。 PSP类毒素具有钠离子通道阻滞剂的特性,可拮抗箭毒苷、 藜芦碱的作用, 以减少或 解救细胞形态的改变及细胞裂解死亡, 且此拮抗或解救作用与 PSP类毒素的量呈剂量反应关系神经细胞生物检验法（PSP\ASP\DSP ） * 免疫学测定方法以抗原一抗体特异性反应为基础 ,其中包括凝集反应、 沉淀反应、 补体反应等 其原理是将兔子等实验动物暴露在毒素中 ,以功能性抗原刺激兔子产生抗体 ,然后从兔子的血清中提取抗体。抗体可用放射性或荧光物质标记。提取的贝类毒素或匀浆后的贝类组织(如贻贝)暴露于标记物中 ,然后检测抗血清一抗原混合物中放射性或荧光强度以测定样品中的毒素的含量。 近十年来 ,用于藻类毒素及贝类毒素检测的免疫学方法得到迅速的发展 ,已有多种可靠的免疫诊断试剂盒用于分析不同的藻类毒素。但由于缺乏与之相关的提纯毒素 ,以及难以从相应的小分子毒素如石房蛤毒素和软骨藻酸中提取稳定的免疫抗原而限制了该法的应用。 免疫学方法具有特异性强、 灵敏度高、 方法简便等优点 ,但交叉反应时偏差较大 * 优越性: (1) 灵敏度高 ,专一性强 ,检出限低; (2)在酸性条件下不稳定的基团如氨甲酰基 N — 磺基在分析的过程中不会解离; (3)缩短了分析时间 ,通过自动注射技术 ,能处理更多的样品 ,便于进行毒素监控; (4)能提供关于毒素的更多信息 ,能测出每 1 个组分的具体含量及毒性的大小 ,从而有助于比较或了解毒素种类的差异 HPLC法是唯一能定性、 定量检测出各种毒素组分的技术 ,HPLC 法发展非常迅速并极有可能代替小鼠检测法成为主要的检测方法。该法也存在一些如测定时需要昂贵的仪器、 专业知识和费时等缺点 气相色谱法：软海绵酸 要将 PSP毒素分子的环结构氧化成荧光生色团 主要应用于 PS