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第39讲 细胞工程
1.植物的组织培养(Ⅱ) 2.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ) 3.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)
[学生用书P277])
一、细胞工程的概念
1.原理和方法:应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法。
2.操作水平:细胞水平或细胞器水平。
3.目的:按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。
4.分类:根据操作对象的不同,分为植物细胞工程和动物细胞工程。
二、植物细胞工程
1.原理:植物细胞的全能性。
(1)原因:生物的任何一个细胞都包含本物种的全部遗传信息。
(2)全能性表达的条件:处于离体状态,提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。
2.植物组织培养技术
离体的植物器官、,组织或细胞)eq \o(――→,\s\up7(脱分化),\s\do5(激素、一定的营养、避光))愈伤组织eq \o(――→,\s\up7(再分化),\s\do5(激素、光))根、芽→植物体
3.植物体细胞杂交技术
(1)去壁:酶解法,所用酶为纤维素酶和果胶酶。
(2)诱导原生质体融合:物理法——离心、振动、电激等;化学法——常用聚乙二醇(PEG)作诱导剂。
(3)植物体细胞杂交成功的标志:杂种细胞再生出细胞壁。
(4)优点:克服不同生物远缘杂交的障碍。
(5)变异类型:染色体变异。
4.植物细胞工程的实际应用
eq \b\lc\ (\a\vs4\al\co1((1)\a\vs4\al(植物繁殖,的新途径)\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(微型繁殖:保持优良品种的遗传特性,高效, 快速地实现大量繁殖,作物脱毒:利用分生区附近(如茎尖)组织, 培养获得脱毒苗,人工种子:胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等, 包上人工种皮制成))))
(2)作物新品种的培育:单倍体育种、突变体的利用。
(3)细胞产物的工厂化生产:培养到愈伤组织阶段。
三、动物细胞工程
1.动物细胞培养:其他动物细胞工程技术的基础。
(1)过程
(2)条件
①无菌、无毒的环境——无菌处理、加抗生素杀菌、定期更换培养液。
②营养——糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素+血清或血浆等天然成分。
③适宜的温度(36.5±0.5 ℃)和pH(7.2~7.4)。
④气体环境——95%空气+5%CO2(维持培养液的pH)。
(3)应用:生产细胞产品,如干扰素、疫苗、单克隆抗体;作为基因工程中常用的受体细胞;检测并判断某毒性物质毒性的大小;临床医学研究。
2.动物体细胞核移植
(1)原理:动物细胞核具有全能性。
(2)过程
3.单克隆抗体制备
(1)诱导动物细胞融合的方法:物理法——离心、振动、电激等;化学法——聚乙二醇;生物法——灭活的病毒。
(2)单克隆抗体制备过程
(3)单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高、可大量制备。
(4)单克隆抗体的应用:作为诊断试剂;用于治疗疾病和运载药物。
1.(2016·北京西城区期末T24A)棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞的全能性。(√)
2.在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中,不会同时发生细胞的增殖和分化。(×)
3.愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的。(×)
4.用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性。(×)
5.再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志。(√)
6.在植物组织培养过程中,可以提取愈伤组织,经过人工薄膜包装得到人工种子。(×)
7.制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理。(×)
8.(2016·青岛市高三监测T25C)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸。(×)
9.(2016·山东泰安市统考T34D)与“多利”羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、细胞培养和核移植。(√)
10.植物原生质体融合和动物细胞融合原理是相同的。(√)
11.小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40,B淋巴细胞的染色体数为46,融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86。(×)
12.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体。(×)
考点一 植物组织培养与植物体细胞杂交[学生用书P278]
1.植物组织培养与植物体细胞杂交的区别与联系
名称
植物组织培养
植物体细胞杂交
原理
植物细胞的全能性
细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性
过程
选材
选取根尖、茎尖、形成层部位最容易诱导脱分化
不同种的植物体细胞融合后形成杂种细胞
技术操作
脱分化、再分化等
除脱分化、再分化外,还要用酶解法去除细胞壁,用一定的方法诱导原生质体融合
关系
植物组织培养是植物体细胞杂交的基础,植物体细胞杂交所用的技术更复杂
2.单倍体育种和突变体的利用的不同点
项目
原理
优点
成果
单倍体育种
染色体变异
明显缩短育种年限
单育1号烟草品种,中花8号、11号水稻
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