口腔扁平苔藓患者白色念珠菌检出率及分离株SAP表达的研究林姬艳.PDFVIP

口腔扁平苔藓患者白色念珠菌检出率及分离株SAP 表达的研究 林姬艳 舟山市口腔医院 口腔科 316000 【摘要】目的：观察分析口腔扁平苔藓(OLP)患者白色念珠菌检出率及分离株分泌性天 冬氨酸蛋白酶(SAP)的表达相关性。方法：选取2014 年1 月~6 月100 例OLP 患者为观察 组，选取同期100 例健康体检无口腔黏膜疾病者为对照组，采用含漱浓缩培养法收集白色 念珠菌分离株，鉴定后与人口腔表皮样癌细胞(KB)共同培养，观察比较两组患者白色念珠 菌检出情况、分离株形态学特点及与 KB 细胞共培养后不同时间段 SAP 表达阳性情况。 结果：观察组白色念珠菌阳性率为34.0%，高于对照组的17.0%，差异有统计学意义 2 （χ=7.606 ，P0.05 ），SAP1 在共培养6、12、24h 阳性表达率高于对照组，SAP3 在共 培养6、12、24h 阳性表达率高于对照组，SAP5 在共培养6、12h 阳性表达率高于对照组， 差异均有统计学意义（P0.05 ）。结论：口腔扁平苔藓患者白色念珠菌检出率较健康人群 高，与KB 细胞共培养后在SAP1、3、5 基因阳性表达较健康人群有显著增高，白色念珠 菌（CA ）的高毒力基因表达差异可能与CA 和OLP 有一定的相关性。 【关键词】口腔扁平苔藓； 白色念珠菌； SAP 表达 Oral lichen planus patients with Candida albicans isolates detected rate and expression of SAP [1] 口腔扁平苔藓（OLP ）是慢性扁平苔藓最为常见的口腔伴发病变，有研究认为 其存 在0~2% 的恶变率，因此被认为是癌前状态表现之一，其危险因素较多，发病机制尚不明 [2] 确 ，其中作为口腔感染最为常见真菌病原体，白色念珠菌感染（CA ）感染与OLP 感染 临床表现较为相似，在OLP 患者口腔及病损局部白色念珠菌检出率较高，抗真菌治疗对其 [3] 有效 ，因此国内外对CA 在OLP 发病与进展及相关治疗中的作用逐步关注增多，作为 CA 细胞外水解酶中的分泌性天冬氨酸蛋白酶（SAPS）可促进CA 上皮细胞粘附能力，破 [4] 坏宿主组织防御系统 。本文通过观察100 例OLP 患者CA 检出率及分离株SAP 表达的特 点，分析CA 的SAPS 与OLP 发生的关系，现报道如下。 1 对象与方法 1.1 研究对象 选取2014 年1 月~6 月舟山市口腔医院就诊的OLP 患者100 例为观察组，所有患者均 有典型OLP 临床表现，经2 名以上高年资医生确诊，入选前3 个月未服用抗生素及抗真菌 药物治疗，且无其他口腔黏膜疾病。其中男性45 例，女性55 例，年龄在47~69 岁，平均 年龄（56.3 ±4.2 ）岁，普通型OLP 63 例，充血糜烂型OLP 37 例。选取同期100 例健康体 检无口腔黏膜疾病者为对照组，其中男性44 例，女性46 例，年龄在45~68 岁，平均年龄 （55.8 ±5.2 ）岁。两组患者在性别、年龄等方面无统计学差异（P0.05 ），具有可比性。 1.2 方法 两组患者均采用含漱浓缩培养法充分含漱灭菌PBS 1min 后收集含漱液，3500rpm 离心 5min，取1mL 沉淀涂在沙氏琼脂培养基上培养48h ，出现菌落后挑取典型菌落划线接种在 SDA 上，隔日转种，连续3 次，采用念珠菌显色培养、芽管形成试验、厚膜孢子形成实验 [5] 及45 ℃生长试验鉴定白色念珠菌 ，RPMll640 细胞培养液内悬浮培养并分时段收集观察形 态学特点，接种环从SDA 培养基上挑取经过鉴定的CA 临床分离株菌落数个，加入不含胎 牛血清fl 向RPMll640 细胞培养液中培养，与KB 细胞共培养，提取细胞与CA 共培养物 [6] 的总RNA 及SAP1-10 基因表达情况 。 1.3 观察指标 观察比较两组患者CA 检出情况、分离株形态学特点及与KB 细胞共培养后6、12、 24h SAP 表达阳性