12基因工程操作程序.ppt

1.2 基因工程的基本操作程序;补：原核细胞的基因结构;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;;基因工程基本操作的四个步骤;一、目的基因的获取;(一)从基因文库中获取目的基因;;2.基因文库的构建方法;②反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。;③根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ：;上述三种目的基因提取的方法有何优缺点？;(二)利用PCR技术扩增目的基因;① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ;⑥过程：;;1.用一定的_________切割 质粒，使其出现一个切 口，露出____________。 2.用_____________切断目 的基因，使其产生_____ ____________。;质粒;5.基因表达载体的组成：;(三)将目的基因导入受体细胞;1、将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法 （1）农杆菌介绍 （2）原理及适用范围;2、将目的基因导入动物细胞 （1）方法：显微注射法 （2）程序： ;(四)目的基因的检测与鉴定;DNA分子杂交示意图 ;1）不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;2）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶;3）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;4）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达;