神经干细胞单细胞与神经球治疗脊髓损伤大鼠对比的研究.doc

目  录 中英文词汇对照表……………………………………………………1 中文摘要………………………………………………………………2 英文摘要………………………………………………………………4 前言……………………………………………………………………6 材料与方法……………………………………………………………8 结果……………………………………………………………………18 讨论……………………………………………………………………21 结论……………………………………………………………………23 参考文献………………………………………………………………24 附录……………………………………………………………………27 致谢……………………………………………………………………29 综述……………………………………………………………………30 附图……………………………………………………………………40 4 英文缩略词对照表 Abbreviation 英文缩写 SCI NSCs BBB bFGF EGF MAP-2 GFAP FITC PBS DXM PFA CNTF  英文名称 spinal cord injury neural stem cells Basso-Beattie-Bresnahan scords basic fibroblast growth factor epidermal growth factor microtubule-associated protein 2 glia fibrillary acid protein fluorescein isothiocyanate Phosphate buffer saline Dexamethasone Polyoxymethylene Ciliary Neurotrophic Factor  中文全名 脊髓损伤 神经干细胞 BBB 评分 碱性成纤维细胞生长因 子 表皮生长因子 小鼠抗微管相关蛋白 2 神经胶质原纤维酸性蛋 白 异硫氰酸荧光素 磷酸盐缓冲液 地塞米松 多聚甲醛 睫状神经营养因子  1 神经干细胞单细胞与神经球治疗脊髓损伤 大鼠的对比研究 摘要 目的 探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的方法及其有效性。 方法 原代培养神经干细胞，体外无菌环境中分离脊髓组织，剪碎吹散后，置于神 经干细胞培养基中进行细胞培养，并作传代培养，3 代后离心浓缩神经干细胞，分 成神经单细胞悬液和神经球两组，4℃冷藏保存。实验分神经单细胞悬液、神经球、 生理盐水三组，对 60 只采用改良 Allen 法制备大鼠脊髓 T10 损伤模型的 SD 大鼠 随机分组，对神经单细胞悬液和神经球两组进行神经干细胞移植。于术后 3、7、 14、21、28d 对模型大鼠采用 BBB 评分系统监测大鼠运动功能恢复情况，并于术 后 3、7、l4、21、28 d 取材，应用组织学和免疫荧光染色方法观察脊髓组织及神 经细胞的变化，并用免疫荧光法标记神经元，观察其分化比例，运用统计学方法 对数据进行统计分析。 结果  移植组后肢运动功能评分3天无明显改善，随时间延长而逐渐升高，移植7 天时后肢运动功能有所改善，但与对照组无明显差异。损伤后3天、7天神经球实 验组MAP-2细胞数较两个对照组也无统计学意（P0.05）。14天、21天、28天实验 组BBB评分分别为（14.8±1.5）、（16±0.8）、（17.8±2.4）经统计后，效果明 显优于其它两个对照组（P0.05），而且对照组2优于对照组1，经统计有统计学意 义。14、21、28天MAP-2阳性细胞数分别为（17.0±1.0）、（18.8±1.5）、（19.4 ±3.6）均明显高于其它两个对照组，经统计分析亦有统计学意义（P0.05）。 结论 神经球移植可以增加神经元的分化比率，促进其向神经元方向分化，更有利 于脊髓损伤后的功能恢复。 2 关键词 神经干细胞 脊髓损伤 免疫荧光 移植 3 Comparative study of single cell suspension of neural stem cells and neurospheres transplantion for rats with spinal cord injury Abstract Objective  To explore the method and therapeutic effect of neural stem cells transplantation for spinal cord injury. Methods  The neural stem cells were isolated from the spinal cord, purified an