不稳定性心绞痛患者KLOTHO基因C1818T多态性分析.docxVIP

不稳定性心绞痛患者KLOTHO基因C 1818T多态性分析 :金鸣锋何国平高磊张寄南 【摘要】 目的：探讨KLOTH0基因C 1818T多态性与 中国 苏皖地区汉族人群不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris, UAP) 的可能关系。方法：应用聚合酶链反应(PCR)及基因芯片(gene microarray)方法，检测146例UAP患者和235例非冠心病者的 KLOTH0基因C 1818T多态性。结果：与对照组相比：(l)UAP 患者CC, CT和TT基因型以及T等位基因型频率分布差异无统计 学意义(P值均〉0.05)；⑵年龄lt;60岁的UAP组TT基因型频 率和女性UAP组TT基因型，T等位基因频率均明显升高(P值分 别为0.017, 0.049, 0.026)。在调整相关危险因素并经多元Logistic 回归分析后，TT基因型与女性UAP的发生存在相关性 (P=0.041),而T等位基因与女性UAP的发生无明显关联 (P=0?472) o结论：在中国苏皖地区汉族人群中，KLOTHO基因 C 1818T多态性TT基因型与女性UAP的发病存在相关性。 【关键词】KLOTHO；基因多态性；不稳定性心绞痛 ［Abstract ］ Objective: To investigate the possible association betorphism and unstable angina pectoris (UAP)in a Chinese Han population of Su coronary artery disease. The KLOTHO gene polymorphism ined by polymerase chain reaction and gene microarray. Results： pared ale (P value ore, after adjustment for conventional risk factors by multiple logistic regression analysis shoale carrier (P=0.041), but the T allele had no association ale (P=0.472)? Conclusion： The TT geype of KLOTHO gene C 1818T polymorphism ale among the Chinese Han population of Suorphism; unstable angina pectoris 内皮细胞的凋亡及更替在动脉粥样硬化斑块形成中起着关键的 作用［1,2］。Kuro o等［3］发现动脉粥样硬化是KLOTHO基 因缺陷鼠的一种表型，对KLOTHO蛋口的研究［4-9］认为它可通 过上调血管紧张素转换酶(ACE)、调节内皮细胞释放血管内皮生 长因子、NO等产物及改善血管应激、影响血管紧张度和血栓形成 达到抗粥样硬化作用，从而保护心血管系统。以上研究表明 KLOTHO基因与动脉粥样硬化存在着重要的联系。虽然目前所知与 动脉粥样硬化形成相关的基因已有400个左右，但对动脉粥样硬化 候选基因进行的一系列大规模基础研究尚未获得预期结果 ［10,11］ o本研究旨在探讨中国苏皖地区汉族人群KLOTHO基因 C 1818T多态性分布及其与不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris, UAP)的相关性。 1对象与方法 1.1研究对象 入选病例均选自2003年11月?2007年2月在江苏大学附属武 进医院、江苏省人民医院住院患者。选择UAP患者（UAP组） 146例，男117例，女29例，年龄41?84 （平均65.82±9.47） 岁,均符合2002年AHA/ACC关于UAP诊断指南的诊断标准。对 照组为经相关检查排除冠心病者235例，其中男138例，女97例， 年龄36?84 （平均61.58± 10.93）岁，大部分经冠状动脉造影证实 冠状动脉主支无狭窄或狭窄直径小于50%o所有研究对象均为中国 苏皖地区汉族人。 1.2方法 1.2.1聚合酶链反应（PCR）酚 氯仿法提取白细胞基因组 DNA o由TaKaRa公司合成引物，上游引物：5 GAATGTTTACCTGTGGGATG 3’ ,下游引物：5’ 丙烯酰胺 TGTGGTTCACCTGGGACT 3’ ,预计PCR扩增产物片段长 度为209 bpo反应体系:10X缓冲液5 Ml, Mg2+终浓度为2.0 mmol/L, 4种dNTP终浓度为0.2 mmol/L,上下游引物各5 pmoh Taq DNA 酶 1.25 U （TaKaRa）,模板 DNA 100 ng。反应条件：