试验5多克隆抗体制备及效价测定.pptVIP

多克隆抗体的制备及抗体效价测定 目的要求 掌握多克隆抗体制备的基本原理。 掌握多克隆抗体制备的操作步骤。 掌握肥达反应的实验原理、操作流程和结果判断。 熟悉ELISA的实验原理、操作流程和结果判断。 了解细菌抗原和病毒抗原免疫程序上的异同。 了解免疫动物的选择原则。 原理 1、克隆(clone)： 是指无性繁殖细胞系，是由单一个祖先细胞分裂繁殖而形成的一簇细胞纯系。在这个家族的所有成员中，如无突变发生，其基因是完全相同的。 2、多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）：用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物，即多克隆抗体。 3、单克隆抗体（monoclonal antibodies, mAb）：由一个识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同源抗体。高度均一、特异性强、效价高、少或无交叉反应性。 抗体的制备技术经历了三代： 第一代抗体是传统的抗体制备方法即利用抗原免疫动物后获得抗体，称为多克隆抗体（polyclonal antibody）； 第二代抗体是通过杂交瘤技术制备出针对抗原中某一抗原决定簇的抗体称为单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)； 第三代抗体是利用基因工程技术制备而来，称为基因工程抗体(gen