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实验粗蛋特白质的测定
实验五:粗蛋白含量的测定(微量凯氏定氮法);消化:NH2(CH2)2COOH+3H2SO4→2CO2+3SO2+4H2O+NH3
2NH3+H2SO4 →(NH4)2SO4
蒸馏:(NH4)2SO4 +2NaOH→2H2O+Na2SO4+2NH3
吸收:NH3+4H3BO3 →NH4HB4O7+5H2O
滴定:NH4HB4O7+HCl+5H2O →NH4Cl+4H3BO3 ;2. 实验材料、仪器与试剂
材料:豆奶粉
仪器:消化炉,100mL容量瓶,微量凯氏定氮蒸馏器,125mL三角瓶,酸性滴定管,移液管。
试剂:浓硫酸,硫酸铜,硫酸钾,40%氢氧化钠,2%硼酸溶液,0.1mol/L盐酸溶液,溴甲酚绿—甲基红混合指示剂。;3. 实验步骤
(1)消化: 准确称取豆奶粉样品0.5g左右,置于消化管中,加入6g硫酸钾、0.2g硫酸铜,再加20mL浓硫酸摇匀,待剧烈反应结束后,在消化炉上消化,待溶液澄清透明后再消化30min,然后将消化液无损地转移到100mL容量瓶中,定容。;样品0.5g
0.2g硫酸铜
6g硫酸钾
20mL浓硫酸;(2)蒸馏、吸收与滴定:装好微量定氮装置,准确移取消化稀???液5mL于反应管内,经漏斗再加入10mL40%氢氧化钠溶液,用少量蒸馏水洗漏斗数次,夹好漏斗夹,进行水蒸汽蒸馏。冷凝管下端预先插入盛有10mL 2%硼酸吸收液的液面下。蒸馏至吸收液中所加的混合指示剂变为绿色开始计时,继续蒸馏5min后,将冷凝管尖端提离液面再蒸馏1min,用蒸馏水冲洗冷凝管尖端后停止蒸馏。然后用0.01mol/L盐酸滴定吸收液。;微量凯氏定氮蒸馏装置(凯氏);4. 结果计算 ;
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