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心房碎裂电位区域病理组织学特点 由德君 常栋 张树龙 高连君 杨延宗 大连医科大学附属第一医院心内科 目 的 方 法 HE染色 免疫组化（PGP9.5染色） 镜下观察 通过HE染色，观察碎裂电位区域和非碎裂电位区域心房肌组织的分布与排列特点 通过PGP9.50染色，于20倍光镜下计数自主神经组织个数/mm2，比较碎裂电位和非碎裂电位区域自主神经分布的差异 结 果 碎裂电位区域与非碎裂电位区域自主神经组织的个数比较 讨 论 本实验显示 非碎裂电位区域心肌排列规整匀齐 碎裂电位区域心肌纤维排列紊乱 讨 论 文献报道碎裂电位主要集中在肺静脉、左房前壁、间隔部、冠状窦、左房顶部和左后间隔二尖瓣峡部等部位 ，均位于心房的解剖障碍区，组织结构紊乱 心房肌组织结构异质性可致不应期离散和各向异性传导增加 Konings等认为不应期离散、组织各向异性传导增加可使激动离散，形成碎裂电位 讨 论 讨 论 Scherlag等和Lin等刺激犬心脏自主神经节时 在邻近部位均记录到碎裂电位，并进一步发现 神经递质尤其是乙酰胆碱的释放显著缩短了局 部心房不应期，从而导致高频激动及碎裂电位 讨 论 讨 论 结 论 犬心房碎裂电位的产生可能与该区域心肌细胞排列紊乱及富含自主神经密切相关，这可能是房颤发生和维持的重要基质 * * 背 景 心房颤动（房颤）过程中，在心房某些部位可以记录到高频低幅的电位 ，称为碎裂电位（CFAEs） 碎裂电位消融是目前房颤，特别是慢性房颤 治疗的重要辅助策略，但机制仍不清楚 新近研究显示碎裂电位产生与自主神经密切 相关，但目前尚无病理组织学证据 分析碎裂电位分布区域病理组织学特点 探讨碎裂电位发生机制 刺激颈部迷走-交感神经干+心房内高频刺激诱发房颤 标测和冷盐水灌注消融碎裂电位区域作为取材标记 10只成年杂种犬 分离颈部迷走-交感神经干 右室起搏保护 多导生理仪记录肢体导联及心内心电图 取出心脏固定组织标本 标本取材，HE和PGP9.50染色 光镜下观察分析 碎裂电位标测 碎裂电位指心内电图呈连续曲折且无明显等电位线的心房电活动 碎裂电位区域消融 图中箭头所示碎裂电位消融区域呈苍白色 切片常规脱蜡至水 苏木素染色 伊红染色 脱水、透明、封片 光学显微镜下观察 捞片后置烤箱58-60℃ 12h以上使切片紧密黏附 切片常规脱蜡至水 0.3%H2O2 ，PBS液浸洗2 minX3 滴加正常山羊血清封闭液，室温（22-25）10分钟 甩去多余液体 滴加适当一抗。37℃ ，4℃ 过夜 PBS洗2分钟3次，滴加二抗20-30℃15分钟，PBS洗2分钟3次 DAB显色：苏木素轻度复染，脱水，透明，封片 显微镜观察 抗原修复 HE染色（20倍光镜 ） 非碎裂电位区域 碎裂电位区域 个/mm2 7±5.4 vs. 1.9±2.7，P0.001 一、碎裂电位与心房肌组织结构异质性关系 一、碎裂电位与心房肌组织结构异质性关系 因此，碎裂电位区域心肌组织结构 异质性可能是增加电冲动各向异性 传导，形成碎裂电位的组织结构基础 一、碎裂电位与心房肌组织结构异质性关系 二、碎裂电位与自主神经分布的关系 本实验显示碎裂电位区域较非碎裂电位区域 自主神经组织含量明显增多 （7±5.4 vs. 1.9±2.7，P 0.001） 二、碎裂电位与自主神经的分布关系 本实验从病理组织学角度提示碎裂电位区域自主神经分布明显增多，这可能是碎裂电位产生的重要组织基础 二、碎裂电位与自主神经的分布关系