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微生物学实验 指导老师：袁洪生 李兰芬 臧淑萍 实验一 细菌的形态观察 目的要求：见实验教程 P.16实验二-1 基本原理：见实验教程P.16 实验二-1 实验内容 1.实验室环境及体表微生物检查(检查手指、头发、钱币等携带微生物的情况4人一个培养皿) 2.记录三种细菌的菌落特征 3.绘制三种细菌个体形态图，并对革蓝氏染色结果小结 4．思考题：实验2-(一)、（二）题 三种细菌的菌落特征 绘制三种细菌个体形态图，并对革蓝氏染色结果小结 实验二 放线菌的形态观察 目的要求：见实验教程P.24 实验二-3 基本原理：见实验教程P.24 实验二-3 实验内容 1.记录三种放线菌的菌落特征 2.记录并绘制三种放线菌的个体形态及生殖方式图 3.思考题：在平板上如何识别细菌和放线菌的菌落？ 三种放线菌的菌落特征 绘制三种放线菌的个体形态及生殖方式图 实验三 酵母菌形态观察及细胞计数 目的要求： 观察并掌握酵母菌的菌落特征、个体形态及生殖方式。 基本原理： 见实验教程 P.26实验3-1, P.97 实验8-1 实验内容 1.记录两种酵母菌的菌落特征 2.记录并绘制二种酵母菌的个体形态及生殖方式图 3.?(1)用血球计数板计算酵母菌悬液的细胞数 (2)用显微镜测微尺测量酵母菌细胞的大小 4. 思考题：在同一平板上如何识别细菌和酵母菌的菌落？ 两种酵母菌的菌落特征 二种酵母菌的个体形态及生殖方式图 实验四 霉菌的形态观察 目的要求： 1.观察霉菌的菌落特征。 2.掌握霉菌制片方法，观察霉菌个体形 态及各种无性和有性孢子。 基本原理：见实验教程P.29, 实验三-2 实验内容 1. 记录三种霉菌的菌落特征 2. 对三种霉菌制片、观察、记录并绘制 三张霉菌个体形态及生殖方式图 3.四大类微生物形态特征总结 三种霉菌的菌落特征 三种霉菌个体形态及生殖方式 实验考察 (1)如何从菌落特征上识别四类菌? (2)四类菌在制片上有何特点? 实验五 培养基的配制与灭菌 目的要求： 1. 学习和掌握分离四类菌常用的培养基配制方法。 2. 学会四类菌稀释分离和计数时所用物品灭菌前后的准备工作。 3. 了解实验室常用的消毒灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌技术。 基本原理：见实验5-1、5-2、5-3、5-5及附录三 实验内容 配制四类菌分离用培养基(注意调pH)、分装。 (按卡片每三人一组配制其中一种培养基，但要求四种都会配) 2. 准备大小枪头、小离心管、玻璃刮刀、无菌水等，培养基的配制量及分装方法见实验台上卡片。 3. 高压蒸汽灭菌，灭菌后摆放斜面。 先检查高压锅内水量，关闭高压锅盖时用力要均匀， 放气2-3分钟后关闭放气阀，待压力接近0.1Mpa时调节 成小火并计时,保持20分钟后关火,自然冷却待压力降为0时打开放气阀后再打开高压锅。 4. 实验室常用消毒灭菌方法(示范) 干热灭菌、紫外灭菌、过滤除菌、化学消毒法等。 实验记录 1. 记录你所配的培养基名称、成分、pH及配制分装方法。 2.注意高压蒸汽灭菌操作过程及关键 实验六 土壤中微生物的分离与培养 目的要求：见P.66实验6-1 基本原理：见P.66实验6-1 实验内容 1.先按卡片配制生理生化、噬菌体效价测定用培养基，灭菌 2．稀释分离： 3. 划线分离：取10-2菌悬液做划线分离 （每人做四块平皿: 三种稀释度各一块、划线分离一块） 4．菌落计数：（下周做）只数可认定的菌落，三人结果取平均。 5. 斜面接种及培养：（下周做）每人自不同平板上分别各接一支四类菌斜面，培养后检查接种结果。 6.?菌种保藏(示范)：斜面转接法、低温保藏法 、沙土管保藏法、冷冻干燥保藏法。 稀释分离 注意事项 分离放线菌在99ml无菌水中加10滴10%苯酚 (抑制细菌生长) 分离霉菌在马丁培养基熔化冷却后加入2ml去氧胆酸钠(2%)和0.4ml链霉素(1万单位/ml) 实验记录 P.73实验6-1表(二)、 (三) 、(五) .思考题： P.74实验6-1（二）、（四）、 (五) 实验七几种细菌的生理生化反应实验 目的要求：见实验教程 P85 ,P88 基本原理：见实验教程 P85 ,P88 实验内容（按下表接种 ） 生理生化实验结果观察 ?实验八 噬