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3D 中空纤维细胞培养系统
蠕动泵、培养筒、培养基储液瓶通过导管连接构成一个连续流动的体系。
中空纤维作用类似于微血管,纤维直径大约200μm,并可选择不同通透率的纤维。
培养基流经中空纤维内部,而细胞培养在纤维内或外;在培养的细胞与流动的培养基之间形成一个半透膜的屏障。乳酸、葡萄糖等
小分子可以自由穿透纤维。
立体几何形纤维适用于贴壁与悬浮细胞培养。
细胞生长在中空纤维外时,分泌的产物如单克隆抗体与蛋白质等大分子聚集在小体积的ECS(Extracellular space,纤维管外空间)
中,浓度可高于平板或滚瓶培养100倍。
细胞接种于 针对高密度培养优化的
纤维外空间 CDM-HD,为化学成分 适合于连续收集
限定的血清替代物 高浓度细胞分泌物
培养基在中空纤维生物反应器
(Hollow fiber bioreactors,
HFBR)中不断循环以提供营养
物质和氧气,同时带走废物和CO2
细胞周围的独特环境
封闭的生物安全系统 受到纤维截留分子量
符合cGMP标准 (MWCO)的控制
细胞附着在多孔支架上减缓细胞分裂
降低细胞对血清的要求
可连续培养数月或以上
易于适应无血清培养
改善细胞功能及所分泌的产物,如蛋白质折叠和翻译后修饰
增加细胞分泌产物浓度10-100倍
建立稳态、更类似于体内生长条件
在高密度生长条件下,细胞拥有最类似
渗透出废弃物与细胞抑制因子
于体内细胞生长方式
封闭系统提高生物安全
不需传代,提高细胞活率,减少细胞凋亡 适用于悬浮细胞与贴壁细胞培养
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单位时间可处理大量细胞(高达10 ) 操作简便,每次换液仅需5分钟
1
中空纤维细胞培养系统是干细胞与293细胞等生产外泌体的理想反应器。由于外泌体不能透过纤维,可收获高浓度的外泌体,并且细胞碎片显著
降低。外泌体还能长时间持续收获,保持活性不变。
使用培养瓶生产外泌体时,需加入血清,因而存在外源外泌体与蛋白杂质,最终产物需要纯化。而细胞在FiberCell系统中培养时,循环培养基
中的外泌体不会进入细胞生长的空间,并且该系统也易适用于无血清环境,或使用血清替代物(CDM-HD,FiberCell)培养,从而得到高纯度
与高浓度的外泌体 ,中型培养筒的单次收获相当于200-250个T175 flask。
A B C
中空纤维富集的外泌体,纯化后以NTA分析(A)和透射电镜(B)验证其物理特性。相较于平盘培养,中空纤维可以更有效地富集外泌体(C)。
培养瓶及C2011中型培养筒培养MS
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