培养基的灭菌于都中学.ppt

学习目标 熟悉植物组织培养的基本过程。 理解细胞分化概念及脱分化，再分化。 课题重点与难点 课题重点：植物组织培养的基本过程。 课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。细胞分化，脱分化，再分化。 活动1： 什么是细胞分化？细胞分化的原因和结果？ 愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？ 脱分化、再分化？ 组织培养的过程？以及组织培养的理论基础？ 脱分化（去分化） 再分化 愈伤组织 2.植物组织培养的理论基础： 细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。 二、植物组织培养的基本过程 活动2： 影响组织培养的因素？ 菊花组织培养应注意的问题？ 三、影响植物组织培养的因素： 3、不同植物激素浓度，使用顺序和使用量 活动3： 用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来?（提示：怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题? ） 本课题内容小结 * 承德二 中 课题1 菊花的组织培养 右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：　（1）步骤①是 ，最常用的方法是 。　（2）步骤②一般常用的化学试剂是 ，目的是 。　　 (3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是 ，其中步骤④相当于 ，步骤⑤相当于 。 （4）植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株。使　　　　　能够在新的植物体上有所表现，其根本原因是　　　　　　　。 去掉细胞壁，分离原生质体 酶解法 聚乙二醇（PEG） 诱导植物原生质体融合 植物组织培养 脱分化 再分化 远缘杂交亲本 的遗传特征 杂种植株获得双亲的遗传物质 （5）若远源杂交亲本A和B都是二倍体，则杂种植株为　　　倍体。　（6）从理论上讲，杂种植株的育性　　。若运用传统有性杂交方法能否实现？　　　。 并说明现由　　　　　 。因此，这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于　　　　　　　　　　　。　 （7）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？　　　　。 四 可育 不能 因为不同种生物之间存在生殖隔离 克服远缘杂交不亲和的障碍，大大 扩展了可用于杂交的亲本组合范围 不遵循。因为在生物进行有性生殖的过程中，才遵循孟德尔的遗传 规律，而植物体细胞杂交育种的过程不属于有性生殖 一、细胞的分化与全能性 细胞分化： 个体发育中，细胞在形态、结构和 生理功能上出现稳定性差异的过程。 特定时空下基因的选择性表达。 形成各种组织器官。 结果： 原因： 定义： 愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 细胞全能性表达条件： 离体 一定的营养物质、激素和其他外界条件 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 1、外植体的选取 2、培养基的配制(MS培养基) 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂也分化 先细胞分裂素， 后生长素 有利于分裂但不分化 先生长素， 后细胞分裂素 实验结果 使用顺序 促进愈伤组织生长 比值适中 促芽分化， 抑根形成 比值低时 促根分化， 抑芽形成 比值高时 结果 生长素细胞分裂素比值 4、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因： 5、pH、温度、光照 菊花： pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 实验操作 （一）制备MS固体培养基 1、配置各种母液 2、配置培养基 ①定容 ② 调PH ③培养基的分装 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 （二）外植体消毒 2、消毒： 流水冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 （三）接种 用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1、