实验五一、 ABO血型鉴定 1.正向定型 2.反向定型 ABO血型鉴定实验原理 正定型 根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合出现凝集反应的原理,用已知IgM类特异性标准抗A、抗B血清室温下与被检红细胞在盐水中反应,若出现凝集现象,表明被检红细胞膜上有血型抗体相对应的抗原,来判断和鉴定被检者的血型。 反定型 用已知标准A,B,O型红细胞分别与被检血清反应,若出现凝集,证明被检血清中存在与该红细胞抗原相对应的抗体。根据血清中存在的血型抗体和Landsteiner定律判断和鉴定被检者血型。 试剂器材 试剂 标准抗A、抗B血型定型试剂 5%(体积比)A,B,O型标准红细胞生理盐水悬液。 生理盐水 器材 试管、试管架、记号笔、吸管、离心机、玻片、显微镜 标本 5%被检红细胞生理盐水悬液,血清或血浆 操作步骤 正定型 试管法: 1:标记试管 取试管两支,分别标记抗A,抗B。 2:加定型试剂 将抗A、抗B试剂各1滴分别加入抗A,抗B试管中。 3:加入红细胞悬液 各加5%被检者红细胞生理盐水悬液1滴于试管中,混匀,以1000r/min离心1min。 4:观察结果 先观察上层液有无溶血现象,再斜持试管轻轻摇动或弹动,使管底红细胞再悬浮,观察有无凝集,如仅轻微凝集或不见凝集,必须将反应物倒于玻片上以低倍镜观察。
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