榄香烯抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖和PCNA基因表达的研究.PDF

·1348 · 中国药理学通报 　Ch inese P ha rm acolog ica l B u lletin　2008 O ct; 24 ( 10) : 1348～51 榄香烯抑制人脑胶质瘤 U251细胞增殖和 PCNA基因表达的研究 1, 2 1 1 1 2 张进华 ,游枫慧 ,杨卫忠 ,陈春美 ,陈崇宏 (福建医科大学 1. 药学院、2. 附属协和医院 ,福建 福州 　35000 1) 中国图书分类号 : R 2877 1; R 32924; R 342 22; R 394 2; 科院上海细胞所 , 细胞培养于含 10% 小牛血清 的 R 730264; R 9776; R 9791 RPM I 1640培养液中 ,在 37 ℃,饱和湿度及 5% CO2 文献标识码 : A 　文章编号 : 1001 - 1978 (2008) 10 - 1348 - 04 的培养箱中连续进行细胞培养传代 ,实验时取对数 ( ) 摘要 : 目的　研究榄香烯 elem ene 抑制人脑胶质瘤 U251细 生长期细胞 。 ( ) 胞增殖和抑制增殖细胞核抗原 PCNA 基因表达作用 。方 β 1. 2　主要试剂和仪器 　2 % 榄香烯乳剂由大连金 ( ) 法 　应用四甲基偶氮唑蓝法 M TT 测定不同浓度榄香烯对 港制药有限公司产品 ,M TT、DM SO 均为北京中杉生 人脑胶质瘤 U251细胞的抑制作用 , 同时观察时间 —效应关 物技术有限公司 , RPM I1640 培养基购 自 Gib ico 公 系 ,并求出半数致死浓度 ( IC50 ) ; 免疫组化法检测 IC50浓度 榄香烯作用 0、24和 48 h 的 U251细胞中 PCNA 蛋白表达差 司 , 小 牛血清 购 自杭 州 四季 青 生 物 制 品公 司 , 异 ; R TPCR 检测不 同浓度或不 同作用时间的榄香烯抑制 TR I20L 购 自 Invitrogen 公司 , PCNA 等单克隆抗体 、 PCNA 基因的表达 。结果 　榄香烯对 U251细胞株增殖具有 SP试剂盒和 DAB 染色试剂盒购 自北京中杉生物技 抑制作用 ,呈剂量和作用时间的依赖性 , IC50 为 0062 g · 术有限公司 ; PCR 相关试剂购 自上海博亚公司 。美 L - 1 。榄香烯对 U251细胞内 PCNA 蛋白表达有明显的抑制 国 PE2400 型 PCR 仪 、三恒多功能电泳仪 、D YⅢ水 作用 ; R TPCR 分别证实榄香烯抑制 PCNA 基因的表达 ,其 ( 平型电泳槽 、紫外透射仪 、荧光倒置显微镜 O lym PCNA 基因 mRNA 表达值随药物浓度增加或作用时间延长 ) pu s 等 。 增加而