桥接整合因子1通过c-MYC途径抑制非小细胞肺癌A549细胞中PD-L1.PDF

中国肿瘤生物治疗杂志 ·762 · Chin J Cancer Biother, Aug. 2018, Vol. 25, No. 8 DOI：：10.3872/j.issn.1007-385x.2018.08.002 ∙基础研究∙ 桥接整合因子1 通过c-MYC 途径抑制非小细胞肺癌A549 细胞中PD-L1 的表达 1 1 1 1 1 2 1 李欢 ，王梦杰 ，张翔宇 ，段玉青 ，贾云泷 ，刘欣燕 ，刘丽华 （1. 河北医科大学第四医院肿瘤免疫治疗科，河 北石家庄050035 ；2. 河北省胸科医院 肿瘤科，河北石家庄050035） [摘 要] 目的：研究人非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer ，NSCLC ）A549 细胞中桥接整合因子- 1（bridging intergrator- 1， BIN 1）对程序性死亡受体-配体1（programmed death-ligand 1，PD-L 1）表达的影响及其机制。方法：采用qRT-PCR 和Western blot- ting 方法检测A549 细胞和正常人胚肺成纤维细胞2BS 中BIN1 与PD-L 1 基因和蛋白表达情况，通过基因转染技术、利用阳离子脂 + 质体将含有人全长BIN1 基因序列的真核表达质粒CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-BIN1转染到A549 细胞中（BIN 1 组），构建过 表达BIN1 的细胞株，采用RNA 干扰技术将干扰骨髓细胞瘤病毒癌基因（cellular-myelocytomatosis viral oncogene ，c-MYC）的 c-MYC-siRNA 转染到A549 细胞中（c-MYC-siRNA 组）以敲低c-MYC 基因表达，通过qRT-PCR 和Western blotting 方法验证转染效 果及过表达BIN1 基因或敲低c-MYC 基因对A549 细胞中c-MYC 和PD-L 1 表达的影响。结果：与2BS 细胞相比，A549 细胞中 BIN1 基因和蛋白均呈低表达状态，而PD-L 1呈高表达状态（均P0.05）。将携带BIN1 基因的真核表达质粒转染到A549 细胞后， BIN1 基因和蛋白表达水平较对照组显著升高（P0.05），而PD-L 1 表达显著降低（P0.05）。c-MYC-siRNA 转染到A549 细胞后， 细胞内c-MYC 表达显著降低（P 0.01），PD-L 1 表达明显下调（P0.01）。结论：BIN 1过表达可以通过失活c-MYC 通路降低PD- L 1表达，从而抑制A549 细胞的免疫逃逸。 [关键词] 非小细胞肺癌；A549 细胞；桥接整合因子-1；骨髓细胞瘤病毒癌基因；程序性死亡受体-配体1；免疫逃逸 [中图分类号] R730.2; R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1007-385X （2018 ）08-0762-05 Bridging intergrator-1 inhibits the expression of PD-L1 through c-MYC pathway in non-small cell lung cancer A549 cells 1 1 1 1 1 2 1 LI Huan , WANG Mengjie , ZHANG Xiangyu , DUAN Yuqing , JIA Yunlong , LIU Xinyan , L