应用环介导等温扩增技术LAMP检测蜜蜂黑蜂王台-应用昆虫学报.PDF

应用昆虫学报ChineseJournal ofAppliedEntomology 2014,51(6): 16121619. DOI: 10.7679/j.issn.20951353.2014.189 应用环介导等温扩增技术 （LAMP）检测 蜜蜂黑蜂王台病毒的研究* ** *** 庄明亮 李江红 陈大福 梁 勤 （福建农林大学蜂学学院，福州350002） 本文旨在建立用于临床检测黑蜂王台病毒（ ， ）的环介导 摘 要 【目的】 Blackqueencellvirus BQCV 等温扩增技术（ ， ），为该疾病的检测和防控提供技术支撑。 Loop-mediatedisothermalamplification LAMP 【方法】根据BQCV基因保守序列设计4条特异性引物，探究LAMP扩增的最优条件，并与常规的PCR （ ）检测方法进行比较。 建立的 方法特异性好，检测下限为 ， Polymerasechainreaction 【结果】 LAMP 86fg 灵敏度比PCR 高 100倍。临床检测显示其对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica和中华蜜蜂Apis cerana 均准确有效，且检出率比普通 法高 。 建立的针对 的 检测方 cerana PCR 10%~20% 【结论】 BQCV LAMP 法为养蜂生产第一线检测和预防BQCV提供了技术支持，有一定的应用价值。 关键词 黑蜂王台病毒，环介导等温扩增，检测，诊断 Diagnosisoftheblackqueencellvirus(BQCV)byloop-mediated isothermalamplification ** *** ZHUANGMing-Liang LIJiang-Hong CHENDa-Fu LIANGQin (CollegeofBee Science,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou350002,China) Abstract [Objectives] To establish a simple, fast and a urate method to detect black queen cell virus (BQCV) using loop-mediated isothermal amplification (LAMP),which provides an experimentaldata forcontrollingthe disease. [Methods] Fourprimers based on sixconservedregions oftheBQCV gene sequencewere used to develop optimalLAMP amplification conditions