体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为神经干细胞的实验-中国科技论文在线.PDFVIP

( ) 中国病理生理杂志 　Chinese Journal of Pathophysiology 　2003 ,19 3 :289 - 292 2·89 · ( ) [文章编号] 　1000 - 4718 2003 03 - 0289 - 04 ·论　著· 体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为 神经干细胞的实验研究 1 1 △ 2 1 1 1 1 2 陶 　靖 , 　葛 　坚 , 　黄 　冰 , 　王智崇 , 　郭 　彦 , 　余克明 , 　陈慧怡 , 　陈系古 ( 中山大学 1 中山眼科中心 , 2 实验动物中心 ,广东 广州 510060) ( ) ( ) 　　[摘 　要] 　目的 :探讨体外诱导小鼠胚胎干细胞 ESCs 分化为神经干细胞 NSCs 的可能性。方法 : ESCs 经胚 胎体阶段 , 以视黄酸及视网膜müller 细胞诱导 ,在 NSCs 选择性培养基中筛选培养扩增 7 d ,观察形态变化 ,采用 RT - PCR 法检测 nestin 、glutaminase 、Brn - 3 基因表达及免疫细胞化学法检测 nestin 等 NSCs 特异性标志物 ,并对其扩增 及分化能力进行观察。结果 : ESCs 经初级诱导 ,NSCs 选择性培养基筛选培养 7 d 后 ,形成大量神经球样结构 ,可扩 增传代。绝大部分神经球样结构呈 nestin 抗原阳性 ,整合 BrdU ,表达 nestin 、glutaminase 、Brn - 3 基因 ,且可分化为神 经元及神经胶质样细胞。结论 :视黄酸及 müller 细胞诱导的 ESCs ,经选择性培养基筛选培养可获得 NSCs ,有望为青 光眼等神经变性疾病提供新的治疗途径。 [ 关键词] 　胚胎干细胞 ; 神经再生 ; 小鼠 　　[ 中图分类号] 　 + R329. 2 1 ; R775 　　　　　[文献标识码] 　A 　　青光眼等视网膜视神经疾病 , 由于死亡神经细 ( ) ( 病抑制因子 Gibco 公司 ; 胚胎体 embryonic body , 胞难以再生 , 目前仍属不可逆性致盲眼病。近年来 EB) 培养基 :DMEM + 20 %胎牛血清 + 0. 55 mmol/ L β 利用干细胞诱导分化修复病变组织的研究为神经再 - 巯基乙醇 , NSC 选择性培养基 :DMEM/ F12 培养基 ( μ ( 生领域带来曙光。神经干细胞 neural stem cells , + 2 %B27 + 20 g/ L 碱性成纤维生长因子 basic fi NSCs) 具有自我更新 ,增