红菇属两种凝集素的分离纯化与比较研究.PDF

菌物学报 jwxt@ 15 January 2012, 31(1): 110-118 Http:// Mycosystema ISSN1672-6472 CN11-5180Q © 2012 IMCAS, all rights reserved. 红菇属两种凝集素的分离纯化与比较研究 1,2 1 3 3 2* 张国庆 陈青君 赵爽 王守现 王贺祥 1 北京农学院 农业部都市农业（北方）重点实验室 北京 102206 2 中国农业大学生物学院 北京 100193 3 北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 北京 100097 摘 要：以红菇属大白菇Russula delica 和美丽红菇 Russula lepida 子实体为材料，利用离子交换柱层析、凝胶过滤层 析的手段，分离获得新的凝集素 RDL 和 RLL 。结合凝胶过滤层析和 SDS的手段，确定RDL 和 RLL 分别是分 子量为 60kDa 和 32kDa 的双亚基蛋白，其N-末端部分氨基酸序列分别为 GLKLAKQFAL 和 VWYIVAIKTDVPRTT 。 性质研究表明，RDL 在 20 －70 ℃、低于 25mmol/L HCl 或 12.5mmol/L NaOH 下稳定，其凝集活性可以被邻硝基苯 酚-β-D 呋喃型半乳糖苷（25mmol/L ）和菊糖（50mmol/L ）所抑制；RDL 具有抑制人肝癌 Hep G2 和人乳腺癌 MCF7 细胞增殖以及 HIV-1 反转录酶（RT ）的活性，其半抑制浓度IC50 分别为 0.88μmol/L 、0.52μmol/L 和 0.26μmol/L 。RLL 在 20 －70℃、低于 12.5mmol/L HCl 或 NaOH 下稳定，其凝集活性可以被菊糖（25mmol/L ）和邻硝基苯酚-β-D 呋喃 型半乳糖苷（100mmol/L）所抑制；RDL 具有抑制人肝癌 Hep G2 和人乳腺癌 MCF7 细胞增殖的活性，其半抑制浓度 IC50 分别为 1.60μmol/L 和 0.90μmol/L ，但不具有抑制HIV-1 RT 的活性。 关键词：大白菇，美丽红菇，凝集素，纯化，抗肿瘤 Purification and comparison of two lectins from the genus Russula ZHANG Guo-Qing1, 2 CHEN Qing-Jun 1 ZHAO Shuang3 WANG Shou-Xian3 2* WANG He-Xiang 1Key Laboratory of Urban Agriculture (North) of Ministry of Agriculture, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China 2 College of Biosciences, China Agricultural University, Beijing 100193, China 3Institute of Plant and Environment Protection, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China Abstract: Two novel lectins RDL and RLL were purified from fruiting bodies of Russula delica and Russula lepida using ion exchange chromatography and gel filtration. Based on the results of gel filtration and SDS, both RDL and RLL were * Corresponding author. E-mail: hxwang@ 收稿日期: 2011-06-13, 接受日期: 2011-10-11