光合作用的希尔反应.PDF

植物生物学实验-植物生理部分 实验三 光合作用的希尔反应 实验三 光合作用的希尔反应 【实验原理】 【实验原理】 离体叶绿体加到具有适当氢受体（A ）溶液中，光照后放出 离体叶绿体加到具有适当氢受体（A ）溶液中，光照后放出 氧气。 氧气。 光 2H O +2A 2AH +O 2H O +2A 2AH +O 2 2 2 2 叶绿体 2 2 实验中用的氧化剂A是2,6 －二氯靛酚（2,6-D ），是一种蓝 实验中用的氧化剂A是2,6 －二氯靛酚（2,6-D ），是一种蓝 + + 色染料，接受电子和H 后被还原成无色。在光下，叶绿体 色染料，接受电子和H 后被还原成无色。在光下，叶绿体 将2,6-D还原，从蓝色到无色。通过测定其光密度的变化， 将2,6-D还原，从蓝色到无色。通过测定其光密度的变化， 可以得出叶绿体的还原能力。 可以得出叶绿体的还原能力。 O OH Cl Cl Cl Cl 2 N ＋2H2O 光 2 NH ＋O2 叶绿体 OH OH 氧化型二氯靛氛 还原型二氯靛氛 （蓝色） （无色） DCMU (二氯苯基二甲基脲，dichlorophenyl DCMU (二氯苯基二甲基脲，dichlorophenyl dimethylures,商品名为敌草隆，diuron)等除草剂是作用 dimethylures,商品名为敌草隆，diuron)等除草剂是作用 于光合作用光系统II中质体醌Q 结合部位。它们竞争 于光合作用光系统II中质体醌QB 结合部位。它们竞争 B 性地替换与DI蛋白结合着的质体醌Q ，导致电子传递 性地替换与DI蛋白结合着的质体醌QB ，导致电子传递 B 受阻，抑制Hill反应的发生。 受阻，抑制Hill反应的发生。 非环式光合磷酸化与假环式光合磷酸化均可被DCMU所 非环式光合磷酸化与假环式光合磷酸化均可被DCMU所 抑制，而环式光合磷酸化则不被DCMU抑制。 抑制，而环式光合磷酸化则不被DCMU抑制。 【实验材料】 【实验材料】 菠菜叶片 菠菜叶片 【实验器材与试剂】 【实验器材与试剂】 实验器材：⑴研钵; ⑵移液管; ⑶离心机; ⑷722型分光光度 实验器材：⑴研钵; ⑵移液管; ⑶离心机; ⑷722型分光光度 汁; ⑸500瓦灯泡 汁; ⑸500瓦灯泡 实验试剂：(1) 提取液(0.02M Tris-HCl 缓冲液，含有0.4M 实验试剂：(1) 提取液(0.02M