台盼蓝排斥试验与LDH.docVIP

台盼蓝排斥试验和LDH 试验表明，没有明显的毒性作用在 浓度水平（0–0.5毫克/毫升）使用的研究。这些 的调查结果提高的可能性，可能代表了一种新的PFD 为预防术后的治疗剂。 PFD是一种抗炎和抗纤维化剂， 展品范围内许多类型的细胞的抑制作用 浓度0.2至2毫克/毫升，没有或很少的毒性作用 TGF-β（转化生长因子-β）信号通路在调控干细胞活性和器官形成中发挥着重要的作用，当TGF-β信号通路各成员活性未激活时，体内会自发性发生多种癌症，这表明TGF-β定向调节干细胞对癌症形成也具有不可或缺的功能。TGF-β超家族包含接近30个生长和分化因子，其中有TGF-β?s，活化素(activin)，inhibins和骨形态发生蛋白(BMPs)?。下游的跨膜TGF-β受体是多个SMAD蛋白，这些蛋白是TGF-β超家族信号传递的重要调控分子，并在不同层面上受多种多样精确的调控。 TGF-β与TGF-βII型受体（TGF-βRII）结合后，再激活募集TGF-β?I型受体（TGF-β?RI）组合后形成二聚体形式的受体复合物。TGF-β?RII磷酸化TGF-β?RI的甘氨酸-丝氨酸富集区域（GS序列）并活化TGF-β?RI的丝氨酸/苏氨酸活性。活化的TGF-β?RI反过来又磷酸化受体相关smad蛋白。脊椎动物中目前发现的smad蛋白至少有9种，分别是(a)受体调节的Smads?（R-Smads）：Smad 1,?Smad 2, Smad 3,?Smad 5, and Smad 8; (b)共调节Smads: Smad 4 and Smad 10;（c）抑制性Smads(I-Smads): Smad 6 and Smad 7。Smad 2,和Smad 3参与TGF-β和活化素信号通路，而Smad 1、Smad 5和Smad 8调节BMP信号通路。R-Smads和Smad 4?主要位于细胞质中，它们的活性主要受衔接蛋白调节，如Smad锚定受体激活蛋白（SARA）和ELF。Smad 2和Smad 3直接被TGF-β?RI磷酸化,?使得构象发生改变从而从受体复合物中释放出来。Smad 4蛋白的MH2结构域识别R-Smads C端的磷酸丝氨酸从而形成异质二聚体复合物（R-Smad/C-Smad）。这些复合物转运至细胞核，核内Smad蛋白与同源DNA结合，吸附力较低，但在转录共激活因子的作用下可增强亲和性。Smad 3?和Smad 4?结合于称为SBE的DNA序列，而Smad 2?通过与Smad 4?的相互作用与DNA复合物反应。Smad蛋白在细胞质和细胞核间进行依赖性磷酸化的穿梭对于TGF-β信号的动态调控具重要意义。 本信号转导涉及的信号分子主要包括：Shc，?GRB2，?SARA，?Smad1，Smad2，Smad3，Smad4，Smad5，Smad6，Smad7，Smad8，?SOS，Ras，RhoA，Rac，Cdc42，?Erk1，Erk2，?mDia，MLC，ROCK，LIMK，PAK，c-Abl，Cofilin，Par6，PKC，PI3K，Akt，mTOR，P38，P70，S6K，PP2A，TAK1，MLK3，MEKK1，MKK3，MKK4，MKK6，JNK，Smurf1，Smurf2，CBP，?TF等 PFD对SRA01/04细胞增殖的抑制作用 细胞 PFD显示对HLECs增殖其抑制作用 （图1）。细胞增殖减弱在0.3毫克/毫升 24小时与对照组（P =0.044）相比，后组。 效果更明显的为0.5mg / ml组在24，48， 和72小时（P，0.05）。增殖几乎完全 抑制用1毫克/毫升的PFD在所有的时间点（P，0.01）。该测定法在0.2重复通过精炼的浓度，0.25， 0.3，0.4 0.5和0.6毫克/毫升在三个独立的实验。24小时后治疗，抑制开始在0.25毫克/毫升和 达到在0.5毫克/毫升的最大效果。百分之五十抑制浓度PFD对HLECs增殖（IC 50）为0.47。根据方差的重复测量分析，还有就是PFD浓度之间显著互动和持续时间（P，0.01）。鉴于这些结果，下面的进行实验与使用0.25和0.5毫克/毫升PFD24小时的观察。SRA01的/ 04细胞的细胞活力治疗后PFD 在台盼蓝排除试验，经过24小时的治疗用PFD，活细胞的百分比分别为97.0664.3％,93.7561.6％，93.8562.9％，而对于控制95.1664.8％,0.3，0.5，和1毫克/毫升的PFD组，分别为（图2）。那里 是组间差异无统计学差异显著（P.0.05）。在LDH测定中，24小时后，“治疗具有PFD，所述 细胞介导的裂解的比例分别为13.2265.3％， 14.4263.9％，而对于控制18.1863.3％，0.25和 为0.5mg / m