湿地松、加勒比松SRAP反应体系的优化及引物筛选.docVIP

PAGE \* MERGEFORMAT 3 湿地松、加勒比松SRAP反应体系的优化及引物筛选基金/项目：林业公益性行业科研专项（201104014），广东省林业科技创新专项资金项目（2008/2009KJCX007-02） 基金/项目：林业公益性行业科研专项（201104014），广东省林业科技创新专项资金项目（2008/2009KJCX007-02），广东省科技厅（2007A020200001-1），广东省林业局林业种苗与基地管理总站（2009），北京林业大学林木育种国家工程实验室开放课题项目(FOP2010-3)。 *通讯作者：李义良，男，河北涿州人，广东省林业科学研究院助理研究员。 李义良* 赵奋成 吴惠姗 （广东省林业科学研究院，广州，510520） * 摘 要 采用正交设计L9（34）对影响湿地松、加勒比松SRAP反应体系的DNA浓度、dNTPs浓度、引物用量、Taq DNA聚合酶浓度4个因素进行了优化试验，结果表明：扩增反应体系5优于其他体系，即25uL体系中含有DNA 40ng、dNTP 1 mmol/L、引物10 μmol/L、DNA聚合酶1.0 U。在此基础上，通过单因素试验确定了湿地松、加勒比松SRAP反应关键因子的最适浓度，即25 uL反应体系中含有DNA 40 ng、dNTPs 1 mM、引物5 μM及Taq DNA聚合酶1.0 U。利用优