GB/T 36389-2018T4 DNA连接酶.pdf

ICS 07 .080 C 27 国 中华人民共和国国家标准 GB/T 36389-2018 T4 DNA 连接酶 T4 DNA ligase 2018-06-07 发布 2019-01-01 实施 国家市场监督管理总局峪非 中国国家标准化管理委员会 0(.. I (J GB/ T 36389-20 18 目u 昌 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由全~丁－具酶标准化丁－作组（SAC/SWG 11）归口。 本标准起草单位： 福建南生科技有限公司、福建华灿制药有限公司、苏州海狸生物医学丁，程有限公 司、厦门致善生物科技股份有限公司、厦门大学、安琪酵母股份有限公司。 本标准主要起草人：郑登忠、詹学雄、黄发灿、任辉、赵品、章丽丽、宋如11 杰、张永有、姚鹊。 I GB/T 36389-2018 附录 C （规范性附录） 核酸内切酶检测 C.1 原理 pUC19 质粒为环状结构，核酸内切陪能破坏环状结构，两者电泳谱带不一致。 C.2 仪器 C.2.1 电泳仪，备电泳槽。 C.2.2 分析天平（万分之一）。 C.2.3 紫外透光分析仪。 C.3 实验步骤 C.3.1 pUC19 质粒反应 C.3.1.1 在测试管里先后加入4 µL pUC19 质桂DNAO µg/µL）、 14 µL 水、2 µL 陋， 振荡器混匀，水浴 1 h o C.3.1.2 在对照管里先后加入4 µL pUC19 质粒DNAO 月／µL) 、 16 µL 水，振荡器混匀，水浴 1 h 0 C.3.2 电泳 1 %～1. 5%琼脂糖凝胶，电泳电压5 V/ cm ~ 10 V/cm，当澳酣蓝线到达凝胶版 2/3 时停止电泳，取 州凝胶板置于紫外透光分析仪观察和l拍照。 C.4 结果判定 在电泳艇上，肉H良观察。 若测试管和对照管的谱带一致，则判定样品中不含有内切酶；若不一致， 则 判定样品中含有内切酶。 GB/ T 36389-2018 引 T4 DNA 连接酶来源于重组基因丁，程菌，催化相邻DNA链的 5’－P 末端和3’－OH 末端以磷酸二醋 键结合的反应，促使蒙古性末端之｜可或平末端之间的连接。 制订T4 DNA 连接酶同家标准，用以椎动该 类，丁具隅的产业化具有重要的意义。 II GB/ T 36389-2018 T4 DNA 连接酶 1 范围 本标准规定了 T4 DNA 连接酶的技术要求、检盼方法、包装、运输、贮存和保质期。 本标准适用于从重组基因T程菌分离纯化的 T4 DNA 连接隅。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日 期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件 。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。