GB/T 35901-2018猪圆环病毒2型荧光PCR检测方法.pdf

ICS 11.220 B 41 国； =11:. 中华人民 和国国家标准 GB/T 35901-2018 猪圈环病毒 2 型荧光 PCR 检测方法 Real-time PCR method for detection of porcine circovirus type 2 2018-02-06 发布 2018-09-01 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 3590 1-20 18 目u 昌 本标准按照GB/T 1. 1-2009 给出的规则起草。 本标准由中华人民共和同农业部提出。 本标准向全同动物卫生标准化技术委员会（SAC/TC 1 81）归仁｜ 。 本标准起草单位：中华人民共和同上海出入境检验检疫局、中同农业科学院上海兽医研究所、中华 人民共和同深圳出入境检验检疫局、中同检验检疫科学研究院、湖南圣湘生物科技有限公司。 本标准主要起草人：张强、李健、熊炜、 童光志、赵和平、花群义、李剌清、杨忠苹、李同新、王巧金、 王梅、林颖睁、蔡开妹、喻正军、吴绍强、林祥梅。 I GB/ T 3590 1-20 18 猪圆环病毒2 型荧光 PCR 检测方法 1 范围 本标准规定了猪罔环病毒2 型荧光PCR 检测的操作方法。 本标准适用于猪罔环病毒2 型核酸检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日 期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。 凡是不注日期的引用文件， 其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/ T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/ T 25 172 猪常泪精液生产与保存技术规范 3 缩略i吾 下列缩略i吾适用于本文件。 荧光PCR： 荧光聚合隅链式反应（real-ti me polym巳rase ch ain reaction) 。值： 每个反应管内的荧光信号量达到设定的阔值时所经历的循环数（cy cle thr eshold) DNA： 脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid) Taq f晦： Tαq DNA 聚合酶（Taq DNA polymerase) TE 缓冲液： Tris-EDTA 缓冲液（T r is- EDT A b uffer) PCV： 猪罔环病毒（porcine circovirus) 4 仪器设备 4. 1 荧光PCR 检测仪。 4. 2 高速台式冷冻离心机： 可控泪1至 4 ℃、离心速度可达 12 000 r/min 以上。 4. 3 普通冰箱：2 °C ～8 ℃。 4. 4 普通冰柜： 20 ℃以下。 4. 5 超低温冰箱： 可控泪至一70 ℃以下。 4. 6 微量移液器： 0. 2 11L ~ 2 µL、 1 µL ~ 10 ,uL、 10 µL ~ 100 11L、 20 r1L~ 200 11L、 100 11L ~ 1 000 11L，并 配备与移液器~配的吸头。 4.7 高压灭菌锅。 5 耗材 5. 1 1.5 mL 离心管。 5.2 0 .2 mL PCR 薄壁管或八