课件:酶工程-华南理工大学.ppt

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7. 光诱导反应 a.光聚合反应(二聚作用) b.光裂解反应 四. 制备方法 i. 诱导法:即用设计好的半抗原,通过间隔链与载体蛋白(例如牛血清白蛋白等)偶联制成抗原,然后采用标准的单克隆抗体来制备、分离、筛选抗体酶。 利用过渡肽类似物制备抗体示意图 ii. 引入法 将催化基团或辅助因子引入到抗体的抗原结合部位,可采用选择性化学修饰方法,亦可利用蛋白质工程和基因工程技术 引入法 引入法举例 iii. 拷贝法 用酶作为抗原免疫动物得到抗酶的抗体,再将此抗体免疫动物并进行单克隆化,获得单克隆的抗抗体。对抗抗体进行筛选,应获得具有原来酶活性的抗体酶。 缺点:具有一定的盲目性和偶然性,并且不能产生新酶。 拷贝法示意 五.研究展望 1. 研究酶作用机理,获得蛋白质结构与功能间关系的一般规律。 2. 获得一类新型的蛋白酶。 3. 催化天然酶不能催化的反应。 第三节结束 抗体酶的催化反应 制备方法 酰基转移反应 重排反应 氧化还原反应 金属螯和合反应 磷酸酯水解反应 磷酸酯闭环反应 光诱导反应 a.光聚合反应(二聚作用) b.光裂解反应 诱导法 引入法 拷贝法 第三节结束 点击返回 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考,实际情况实际分析 主要经营:课件设计,文档制作,网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 秉着以优质的服务对待每一位客户,做到让客户满意! 致力于数据挖掘,合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网一站式需求 * * * 退出 Enzyme Engineering 酶工程 第六章 核酶和抗体酶 第一节 ribozyme 第二节 脱氧核酶 第三节 抗体酶 第一节 ribozyme 一、ribozyme的发现 二.Ribozyme的种类 三.Ribozyme研究进展与展望 一、ribozyme的发现 80年代初期,美国科罗拉多大学博尔德分校的Thomas Cech和美国耶鲁大学的Sidnery Altan各自独立地发现RNA具有生物催化功能.从而改变了生物催比剂的传统概念。 为此,T.Cech和S.Altman共同获得了1989年度诺贝尔化学奖。 二.Ribozyme的种类 自然界存在催化分子内反应(incis)的ribozyme(自我剪接型和自我剪切型)和催化分子间反应(in trans)的ribozyme。 1.自我剪接ribozyme分类 自我剪接ribozyme可分为两类: Ⅰ型IVS:均与四膜虫大核rRNA前体的IVS结构相似、催化自我剪接需鸟苷(或5′鸟苷酸)和Mg2+参与。 Ⅱ型IVS :结构与四膜虫的不同,而与细胞核mRNA前体中的IVS相似。它催化自我剪接反应不需要鸟苷或鸟苷酸参与,但仍需Mg2+ 2.自我剪切ribozyme的分类 自我剪切ribozyme, 自我剪切的RNA结构有锤头结构和发夹结构,其中尖头指出自我剪切的部位。 自我剪接ribozyme:包含剪切与连接两个步骤。 几种能进行自我剪切的RNA结构 3.催化分子间反应的ribozyme的分类 如:L-19IVS具有5种酶活性,可催化多种分子间反应。 三.Ribozyme研究进展与展望 对各种已知ribozyme结构与功能关系的研究。可找出其结构功能域和必需基团,据此可进行分子改造,以获得分子更小的、高效的ribozyme 研究热点: 从催化分子内反应的自我剪切ribozyme设计出催化分子间反应的ribozyme. 点击看图 Ribozyme的固定化 Ribozyme的固定化已成功,将在医学、工业上获得应用。 意义: 对各种RNA-蛋白质复合物酶的分离鉴定,对许多具有特别重要生物功能的RNA和蛋白质构成的颗粒体。在自然界将会发现更多的具有自我剪接或自我剪切的RNA分子和以非RNA为底物的ribozyme 第一节结束 Ribozyme的发现 Ribozyme的种类 Ribozyme研究进展与展望 T.Cech和S.Altman 分子内(incis)的ribozyme (自我剪接型和自我剪切型) 分子间 (in trans)的ribozyme 第一节结束 点击返回 第二节 脱氧核酶 一.概念 具有酶活性的DNA分子称为脱氧核酶 脱氧核酶的结构 Carmi等通过体外选择技术合成了一种依赖Ca2+的具有自我切割功能的手枪型二级结构脱氧核酶分子 三.脱氧核酶的催化特性 1.效率高 2.高度专一性 3.活性依赖金属离子 4.其它辅助因子 四.酶促反应动力学特征 1.PH值和温度对酶反应速率的影响 2.激活剂 3.酶浓度对酶反应速率的影响 五.生物学意义 三种脱氧核酶的活性: 连接酶活性 金属螯合酶活性 磷酸酯酶活性 第二节结束

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