构建RFP在宿主中的表达载体并表达蛋白.pptxVIP

《现代生物实验技术原理与技术》学生研讨展示 已有一原核表达载体pCR2.1、RFP蛋白编码基因、以及真核表达宿主Lentinus edodes，构建RFP在宿主中的表达载体并表达蛋白。 课题 实验思路 cut link Target Sequence Origin Vector Vector Host Host transfect Protein detected 方案流程 查找载体、宿主信息 查找基因序列 表达载体筛选 载体转染宿主 构建表达载体 设计扩增引物 转染结果筛选 蛋白表达检测 查找载体信息 pCR2.1 TOPO TA载体 查找宿主信息 香菇（Lentinus edodes）是一种重要的药食两用真菌，产量仅次于双孢菇。 1998年，Sato等以香菇原生质体为材料用限制性酶介导法首次成功转化香菇，将外源基因组整合到香菇的基因组中。 2001年，孙丽等采用PEG(polyethylene glycol , 聚乙二醇)介导法在我国首次建立了香菇遗传转化体系。 2008年，Kuo等建立了香菇电击法遗传转化体系。 2009年，喻义赣等建立了香菇根癌农杆菌介导的遗传转化研究体系。 RFP基因序列查找 Addgene 红色荧光蛋白(Red Fluorecent Protein,RFP)基因是从海葵Discoso-masp中分离出的一种新的荧光蛋白基因,其蛋白质的最大吸收光谱为58