大鼠嗜铬细胞分泌膜片钳和.PDFVIP

第26卷 第9期　 　　　　　华　中　理　工　大　学　学　报　　　　　　　V o l. 26　N o. 9 1998年　9月　　　 　　　　J. H uazhong U niv. of Sci. T ech. 　　　 　　 　　Sep. 　 1998 大鼠嗜铬细胞分泌的膜片钳和 fu ra2联合检测 韦顺会　瞿安连　吴鸿修　周　专 (华中理工大学生物物理与生物化学研究所) 摘　要　在原代培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞上, 综合运用细胞内钙测定法和全细胞膜片钳法, 以检测膜电容 变化为手段测定单一肾上腺嗜铬细胞的胞吐过程. 通过施加+ 20 去极化时引起的钙电流, 对细胞膜电容 mV 的变化以及细胞内钙浓度 [Ca2+ ] 变化的同时检测, 多方位地确定影响细胞分泌的因素. i 关键词　嗜铬细胞; 膜电容; 去极化; 胞吐 分类号　Q 73 　　细胞分泌的中心内容是神经递质和激素以囊 集, 滴加在预涂有多聚赖氨酸的盖玻片上, 加90% 泡为单位储存于胞内, 细胞兴奋时囊泡与质膜融 DM EM 与10% 胎牛血清培养基在37 ℃, 10% CO 2 合, 递质或激素以量子化形式释放至突触间隙或 下进行培养. [ 1 ] 细胞在培养后1～ 7 使用, 标准细胞外液包 胞外 . 一些研究者曾运用膜电容测定法分别测 d [ 2, 3 ] [ 4 ] ( ) 量了牛肾上腺嗜铬细胞 、肥大细胞 、胰腺细 含 单位 : 150 , 2. 8 , 10 , mm o l L N aC l KC l CaC l2 [ 5 ] ( ) 胞、嗜铬细胞瘤 12株系 等分泌事件. 1 , 10 用 调 = 7. 2 , PC M gC l2 H EPES N aOH pH 本研究在应用碳纤电极(Carbon F iber E lec 0. 001T TX (T etrodo tox in) 用于阻断钠电流. 装 trode, CFE ) 电化学检测技术, 实时检测细胞的单 ( ) 入含500 胞外液的测量皿 直径 35 中. 电