重组DNA相关概念.pptVIP

克隆载体(cloning vector) 为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体称为克隆载体。 表达载体(expression vector) 为使插入的外源DNA序列可转录翻译成 多肽链而特意设计的载体称为表达载体。 （一）克隆载体 至少有一个复制起点使载体在宿主细胞中进行自主复制，并能使克隆的外源DNA片段得到同步扩增； 至少有一个选择标志（selection marker）：选择标志是区分含与不含载体的细胞所必需的，包括抗生素抗性基因、β-半乳糖苷酶基因（lacZ）、营养缺陷耐受基因等。 有适宜的RE的单一切点：载体中一般都构建有一段特异性核苷酸序列，在这段序列中包含了多个RE的单一切点，可供外源基因插入时选择，叫多克隆位点（multiple cloning sites，MCS）。 1. 克隆载体应具备的基本特点 （1）质粒 (plasmid) 特点: 能在宿主细胞内独立自主复制；带有某些遗传信息, 会赋予宿主细胞一些遗传性状。 2. 常用的克隆载体 pUC18质粒载体图谱 λ噬菌体DNA改造系统 λgt系列（插入型，适用cDNA克隆） EMBL系列（置换型，适用基因组克隆） （2）噬菌体(phage) M13噬菌体DNA改造系统（含lacZ基因） M13mp系列 pUC系列 柯斯质粒（cosmid）载体（又称黏粒载体） 酵