性传播疾病的实验室诊断.pptVIP

指示物，阳性结果为红色絮 状物 ? 标本采集： –血清 –血浆 操作步骤： 定性： 加样（50μL) 加抗原（一滴） 反应（8min) TRUST试验（1） ? （Tolulizedredunheated serumtest,TRUST） ? 基本原理：用甲苯胺红代替 RPR试验中的碳颗粒，作为 ? ? 定量： – 稀释液（50μL生理盐水) – 加样（50μL血清/血浆) ，倍比稀释 – 加抗原（一滴） – 反应（8 min) 结果判读 – 凝集反应强度分级： ? 3+~4+：中到大凝集物，液体清亮 ? 2+：小到中凝集物，液体较清亮 ? 1+：小凝集物，液体浑浊 ? -：甲苯胺红集中于中央或均匀分散 . TRUST试验（2） ? ? 结果报告： – 定性: 阳性：1+~4+; 阴性 – 定量: 滴度：最高稀释倍数 临床意义： – 适用于筛查、疗效观察、复发或再感染 – 用正常牛心肌的心类脂作为抗原，而不是用螺旋体作为抗原，来测定病人血 清中的反应素（非特异性抗体---抗心磷脂抗体）。 – 用来初步筛查梅毒螺旋体感染。反应素在初期梅毒病灶出现后1~2周就可测 出，在二期梅毒滴度最高，三期梅毒较低。 – 所用抗原不具有特异性，除梅毒病人外，一些非梅毒疾患也可暂时或长期地 存在反应素。例如麻风、结核、传染性单核细胞增多症、红斑狼疮、类风湿 性关节炎、回归热、以及一些发热性疾病。 – 此外，在孕妇、老年人和吸毒者有生物学假阳性反应。 . TRUST试验（3） ? ? ? ? ? 凡确诊为梅毒者，治疗前最好做定量试验。两次定量试验滴度变化相 差2个稀释度以上时，才可判定滴度下降。 梅毒患者在经过正规治疗以后，头三个月应当每月复查一次滴度，以 后可改为每三个月复查一次，第二年每三个月或每半年复查一次，以 观察比较当次与前几次的滴度变化的情况。 梅毒患者治疗后的随访观察一般在两年的时间。 如果每次检测的RPR的滴度呈现不断下降的趋势，说明抗梅治疗是有 效的。 如果连续三次到四次检测的结果都是阴性，则可以认为该患者的梅毒 已经治愈。 . 梅毒疗效判定 ? ? 前带现象：一种抗原—抗体反应的现象。以定量抗原检测抗体，若抗 体过剩，可使所形成的免疫复合物反而减少，而不出现凝集。非梅毒 螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳 性、不典型或阴性反应的结果，而临床上又表现为二期梅毒，此时将 血清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该现象称为前带现象。 耐血清性（血清固定）：晚期耐血清性与梅毒的类型及开始治疗的时 间早晚有关。晚期耐血清性病人已经足够量的治疗后，即使再予更多 地或无限制地治疗也不能使血清滴度降低。对于这种病人，需经过详 细的检查，排除神经、心脏与其他内脏梅毒后，作定期随访。 . 非梅毒螺旋体抗原血清试验 ? treponema pallidumparticle agglutination assay(TPPA). ? 基本原理：超声裂 解梅毒抗原+明胶粒 子+血清抗梅毒抗 体，凝集反应 ? 标本采集： –血清 –血浆 ? 操作步骤： –试剂准备 –加稀释液 –样品稀释 –加致敏明胶粒子和对照液 （4个孔） –混合：震荡30秒 –反应：2小时 . TPPA试验（1） ? ? 结果判读: – 阴性对照：未致敏粒子不出现凝集 – 凝集反应强度分级： ? 4+：粒子光滑，覆盖整个孔底 ? 3+：粒子光滑，覆盖大部分孔底 ? 2+：粒子光滑覆盖孔底，周围有一环 ? 1+：粒子光滑覆盖孔底，周围有一明显环 ? ±：粒子沉集孔底，中央形成一个小点 ? -：粒子紧密沉积孔底中央 结果报告： – 阳性：第3孔不出现凝集，第4孔出现凝集1+~4+ – 阴性：第3孔和第4孔均未出现凝集 . TPPA试验（2） . TPPA试验（3） ? 临床意义： –初筛阳性的确证 –治疗后，TPPA试验仍可为阳性，不能作为疗效 观察 –结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果，区分既 往和现症感染 ? 注意事项： –“可疑”：其他方法复检 –非特异性凝集：稀释复检或其他方法复检 ?