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遗传物质的基本特点 必须稳定地含有关于有机体细胞结构、功能、发育和繁殖的各种信息 必须能精确的复制，使后代具有与亲代细胞相同的信息 必须能够变异，为生物的进化提供基础 生物的遗传物质是DNA DNA双螺旋模型 1953 Watson/Crick 提出了DNA双螺旋结构模型； 意义：对生命科学的发展作用可与达尔文学说媲美，与孟德尔定律齐名。从而使遗传学的研究全面进入分子遗传学阶段． 确定了遗传信息的传递方式 1961 年 Monod 和 Jacob 提出了操纵子学说； 1964 年 Nirenberg 等提出了“三联体密码说”； Crick 提出了遗传信息流向和表达的中心法则 这三大发现大大促进了生命科学的迅速发展，为基因工程的诞生奠定了重要的理论基础． 　　　 右手螺旋：A-DNA、B-DNA、C-DNA、D-DNA 左手螺旋：Z-DNA 螺旋盘绕的松散程度受DNA分子的内力影响，DNA双螺旋结构永远处于动态平衡中，条件变化，B-DNA构象变化，可以形成A-DNA或C-DNA等。 大沟和小沟是DNA行使功能时蛋白质的识别位点，构象发生变化，蛋白质对DNA分子的识别也发生相应变化 DNA超螺旋结构 超螺旋的意义：紧密，体积更小；能影响双螺旋的解链程序，因而影响DNA分子与其它分子之间的相互作用。 包括正超螺旋和负超螺旋，在一定条件下，可互相转变。双螺旋DNA的松开导致负超螺旋，而拧紧则导致正超螺旋。 超螺旋DNA的性质 结构紧密，粘度较低，浮力密度大，沉降速度快。 核内不均一RNA（hnRNA） 真核细胞mRNA的原始转录物是分子量极大的前体，在核内加工过程中所形成的分子大小不一的中间产物。 开放阅读框（open reading frame，ORF） mRNA分子上从起始密码子开始到终止密码子结束的一段连续的核苷酸序列，即mRNA分子上的编码区。 tRNA tRNA的二级结构 aa接受臂（amino acid arm） 二氢尿嘧啶环 （DHU loop） 反密码环（anticodon loop） 额外环（extra loop） TψC环（TψC loop） 同功tRNA：识别同种氨基酸，但反密码子不同的多个tRNA。 多数tRNA和少数tRNA：反密码子相同但结构不同的tRNA。 副密码子：tRNA分子上决定其携带何种氨基酸的区域，能被AA-tRNA合成酶识别。 核酶（ribozyme） 核酶(Ribozyme)是一种具有核酸内切酶活性的反义RNA分子，可特异性地切割靶RNA序列，具有解离后重复切割相同靶分子的能力。 核酶发现的意义 它突破了“酶是蛋白质”的传统概念。 核酸性酶的发现对科学家们普遍感兴趣的生命的起源这一问题有了新的认识，对生物前化学（prebiotic chemistry）有重要贡献。 核酶的类型 剪切型核酶 催化自身或者异体RNA的切割，相当于核酸内切酶。 剪接型核酶 具有核酸内切酶和连接酶两种活性。 核酶的催化活性 核苷酸转移作用 磷酸二酯键水解作用 磷酸转移反应催化作用 脱磷酸作用 限制性内切酶作用 核酸的杂交 定义 不同来源的、序列互补的单链RNA、 DNA，或DNA和RNA，根据碱基互补原则，借助氢键连接为双链分子的过程。 核酸杂交类型 单链DNA与单链DNA杂交（DNA-DNA） 单链DNA与单链RNA杂交（DNA-RNA） 单链RNA与单链RNA杂交（RNA-RNA）  核酸的变性 定义：指核酸双螺旋区的氢键断裂，变成单链，但并不涉及共价键的断裂 变性方法：热变性、酸碱变性、化学变性剂 增色效应（hyperchromicity）由于DNA变性而引起的光吸收增加的现象 DNA的融点（或熔解温度，Tm）DNA分子的一半发生变性时的温度为Tm。 DNA分子的变性是一个爆发过程，变性作用发生在一个很狭窄的温度范围（6～8℃），变性曲线为双曲线 核酸的复性 定义 指变性DNA分子在适当条件下，两条彼此分开的链自发重新缔合成为双螺旋结构 复性过程：成核作用；拉拉链作用 复性条件 足够的盐浓度，0.15～0.50mol/L 合适的温度：比Tm低20～25℃ 样品的性质 DNA的浓度 DNA片段的大小 核酸杂交技术（分子杂交） 分子杂交技术 利用核酸双链的碱基互补、变性和复性的原理，可以用已知碱基序列的单链核酸片段作为探针，与待测样本中的单链核酸互补配对，以判断有无互补的同源核酸序列的存在。 分子杂交的目的就是运用特异性探针鉴定复杂的靶DNA中同源的DNA片段。 双链probe或DNA解链主要取决于： 1．链的长度：链越长，需要的 能量多才能解链； 2．碱基成分：GC含量高，较难