基因工程基本操作流程图教案.docVIP

基因工程基本操作流程图 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 1.目的基因的获取 2.基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 其中在第一步目的基因获取部分之前的内容意在指出获取目的基因的三种方法，即从基因文库中获取目的基因、利用PCR扩增目的基因、人工合成目的基因。但书中的图不容易让人看懂，教学中不妨对此图这部分稍作改动（如图）既可帮助学生梳理知识，而且有助于后面PCR扩增目的基因的学习。 基因工程的基本操作步骤 基因工程的基本操作步骤 目的基因的获取 从基因文库中提取 PCR技术扩增 人工合成 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 人工合成 鸟枪法 反转录 根据已知的氨基酸序列合成DNA法 基因表达载体的构建 基因表达载体的组成： 复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因 第一步 第二步 将目的基因导入受体细胞 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 植物 基因枪法 花粉管通道法 动物：显微注射法 微生物：钙离子处理法 目的基因的检测与鉴定 分子水平检测 个体生物学水平鉴定 导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。 表达检测 转录检测：分子杂交法， 翻译检测：抗原—抗体杂交法 第三步 第四步 对转基因生物进行抗虫或 抗病的接种实验。