芦笋种质资源的SRAP遗传多样性分析研究.docVIP

个人收集整理 仅供参考学习 个人收集整理 仅供参考学习 PAGE / NUMPAGES 个人收集整理 仅供参考学习 芦笋种质资源地SRAP遗传多样性分析-农学论文 芦笋种质资源地SRAP遗传多样性分析 李霞，李书华，杨林，于继庆，李保华，郑鑫，包艳存 （山东省潍坊市农业科学院，山东潍坊261071） 摘要：为了更深入地揭示芦笋品种（系）地遗传多样性，本研究采用SRAP技术对国内外12个芦笋栽培种和杂交种地遗传多态性进行分析.结果表明，从170对引物中筛选出29对多态性强、条带清晰地引物，每对引物产生12~36条谱带，共产生551条谱带，其中多态性条带343条，占总带数地61.21%.平均每个引物扩增地DNA带数是20.41条，多态性带数是12.7条.采用NTSYSpc2.1软件对SRAP扩增结果进行聚类分析，12份芦笋材料地相似系数在0.39~0.97之间，平均相似系数为0.69.在Coefficient=0.69处划等值线，可将12份芦笋材料划分为4类.第一类：‘鲁芦笋一号’、‘88-5’、‘格兰德’、‘07-1’和‘06-6’.第二类：‘阿波罗’、‘泽西巨人’和‘阿特拉斯’.第三类：‘西班牙达玛斯’.第四类：‘荷兰全雄’、‘UC800’和‘西德全雄’. 关键词：芦笋；种质资源；SRAP；遗传多样性 中图分类号：S644.6文献标志码：A论文编号：cja 基金项目：山东省科技发展计划专项计划项目“芦笋超雄株技术研究与示范”(2012GZX21024). 第一作者简介：李霞，女，1976年出生，山东莱芜人，副研究员，硕士，主要从事芦笋遗传育种地研究.通信地址：261071山东省潍坊市胜利东街1921号山东省潍坊市农业科学院，Tel：0536-2118589，E-mail：[emailprotected]. 通讯作者：杨林，男，1980年出生，山东烟台人，农艺师，推广硕士，主要从事芦笋栽培研究.通信地址：261071山东省潍坊市胜利东街1921号山东省潍坊市农业科学院，Tel：0536-2118589，E-mail：[emailprotected]. 收稿日期：2015-10-15，修回日期：2015-12-16. 0引言 相关序列扩增多态性(sequence-relatedamplifiedpolymorphism，SRAP)是一种新型地基于PCR地标记系统，由美国加州大学蔬菜作物系Li与Quiros博士于2001年提出[1].该技术与其他分子标记技术相比有明显地优越性，如实验操作简单、多态性高、在基因组中分布均匀、实验结果稳定、引物具有通用性等. 近年来SRAP技术已被用于黄花蒿[2]、麻栎[3]、甜瓜[4]、葱[5]、桂花[6]等作物地遗传多样性分析和亲缘关系鉴定等方面.芦笋(AsparagusofficinalisL.)，又称石刁柏，是百合科天门冬属植物，该属约有300种，除美洲外，全世界都有分布.核型分析表明该属植物有二倍体、四倍体和六倍体，共同地染色体基数x＝10.目前，国内外对芦笋地研究多集中在同工酶[7-8]、繁殖栽培技术[9-10]、细胞学等方面地研究[11-12]，而关于分子水平地研究较少，李媛媛[13]对芦笋性别连锁分子标记及芦笋性别决定基因克隆地研究概况作了综述.周劲松等[14]2007年，研究表明STS标记Asp1-T7在雄性DNA池与雌性DNA池间具有多态性，可以用来对芦笋雄性两性株S1群体进行性别辅助选择.周劲松等[15]2012年研究表明显性标记Asp-T7和Asp1-T7sp特异性好，扩增效果稳定，均能够鉴别芦笋雌、雄性别；一共测验了14株芦笋两性株自交后代S1代地雄株，从中筛选出2株超雄株.高武军[16]利用RAPD技术对石刁柏雌雄株基因组差异进行了分析，发现了2条雌性相关地RAPD片断，长度分别为928、1178bp.苏俊祥[17]利用RACE技术从石刁柏中分离了一个SUPERMAN类单锌指蛋白地基因AoSUP，并对AoSUP地基因序列、蛋白结构、雌雄株不同营养组织表达差异进行了初步分析.李霞等[18]以芦笋(AsparagusofficinalisL.)为材料，对影响SRAP-PCR扩增结果地因素dNTPs、TaqDNA酶、Mg2+、引物、模板DNA进行了正交优化设计，确立了适合芦笋SRAP-PCR分析地最佳反应体系.寻找芦笋种质间遗传多样性及亲缘关系分析中适用地有效分子标记技术，是目前芦笋品种鉴定、遗传关系分析及种质资源评价工作中急需解决地问题.本研究就采用SRAP技术对12份芦笋种质资源进行多态性分析，在DNA水平上探