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微生物学实习报告 姓名：余洋 专业：临床 日期：2010/10/12 成绩： 合作者：金泽健 陈锦超 显微镜号： 实验室：第一实验室 教师姓名： 无菌操作技术 【摘要】无菌操作技术是整个微生物实验的关键环节，无菌操作技术掌握的熟练程度直接影响着以后整个实验过程。为了认识无菌操作的重要意义，学习基本的无菌技术。我们通过实验室空气微生物学检查，手上细菌的接种和培养，紫外线杀菌试验来熟悉无菌操作技术。 实验结果表明：1)培养皿在空气中暴露的时间越长，培养皿上形成的菌 落就越多。2)由于洗手后未擦干所形成的培养皿上的菌落数比未洗手造成的菌落多。3)照射紫外线的部分菌落数为0，而未照射部分有大量菌落形成。 【关键词】无菌操作；空气沉降；紫外线杀菌；细菌的接种 引言 医学微生物的实验操作对象大多为致病的微生物。由于各种微生物的致病力与传染途径不同，故对不同微生物实验操作也不同。作为实验者必须严格遵守实验操作规则，精益求精把握好实验中的一些细节问题。既要防止自身感染。又要杜绝将病原微生物散布于实验室外的一切可能，而无菌操作技术就是实验成功和防止感染的保证。 本实验结合微生物学实验课“可观测性”的特点，结合三个实验进行细菌形态观察，向学生介绍肉眼可见的细菌菌落。使同学对工作环境无菌及无菌操作在微生物实验中的重要作用加深了解。 实验材料和方法 1. 实验仪器和材料 仪器：接种环、载玻片、酒精灯、培养皿等 材料：SE菌和E.coli，空气及手上细菌 2．实验步骤 ⑴ 实验室空气微生物学检查： 采用自然沉降法检查空气中的细菌。取普通培养基8个，将盖打开，分别暴露空气5，10，15，20，25，30，35，40分钟，然后盖上盖，于平板底部贴上标签，置37℃温箱培养，观察菌落生长情况。 ⑵ 手上细菌的接种培养： 取普通培养基一个，用笔在培养基的底部划线成2等份。并编号1、2（洗手和不洗手）。在无菌间或酒精灯旁进行，先用右手食指涂1号格，再将右手食指用自来水清洗后涂2号格。于37℃培养后结果观察。 ⑶ 紫外线杀菌试验： 取普通培养基一个，用笔在培养基的底部划线成2等份。并编号1、2。以无菌操作【1】的手法，用接种环分别接种SE菌和E.coli到1，2部分。 将接种好的培养皿半开放置紫外灯下照射40分钟。盖上培养皿盖，放37℃温箱中培养。观察结果，从培养箱中取出培养皿，观察其上细菌生长情况，从菌苔特点判断是否有杂菌污染，以判断无菌操作是否合格。 微生物学实习报告 姓名：余洋 专业：临床 日期：2010/10/12 成绩： 合作者：金泽健 陈锦超 显微镜号： 实验室：第一实验室 教师姓名： 试验结果 1. 实验室空气微生物学检查 HYPERLINK /retype/zoom/20d7f54c2e3f5727a5e962e7?pn=2x=0y=0raww=643rawh=97o=jpg_6_0_______type=picaimh=72.41057542768273md5sum=9774326e8cced61b1e85f8d0d933791bsign=6fc702445bzoom=png=0-251jpg=0-21088 \t _blank HYPERLINK /retype/zoom/20d7f54c2e3f5727a5e962e7?pn=2x=0y=97raww=643rawh=76o=jpg_6_0_______type=picaimh=56.734059097978225md5sum=9774326e8cced61b1e85f8d0d933791bsign=6fc702445bzoom=png=0-251jpg=0-21088 \t _blank 从培养皿上看，洗手后未擦干所形成的培养皿上的菌落数比未洗手造成的菌落多。 3. 紫外线杀菌试验 讨论 1. 实验室空气微生物学检查 空气不是微生物存在的自然环境，但空气中带有细菌也常是培养基制备污染的来源。实验室内学生多，大声说话，咳嗽由上呼吸道喷出的微生物可播散到空气中。空气中的细菌在重力的作用下不断向下沉降，降落到培养皿中，曝露时间也长，培养皿中降落的细菌也越多，因此形成的菌落也越多。 2. 手上细菌的接种培养 洗手后未擦干所形成的培养皿上的菌落数比未洗手造成的菌落多。可能原因是由于只用自来水洗而且未擦干，可能并未洗掉手上的细菌，反而带来了大量水中的杂菌。且手上的水在划线时也沾染到培养基上，增加了水分，可能使培养环境更适合细菌生长。 3. 紫外线杀菌试验 紫外线消毒在临床上常用，但其穿透力弱，不宜透过普通玻璃、纸张、尘埃等。因此直接照射紫外线的细菌死亡，培养基上没有菌落出现。而有玻璃盖阻挡的部分菌落生长良好。 （另：结合其他组数据可知：紫外线照射时间越长，菌落数越少，灭菌效果越好。） 实验不足 在