博士论文第三军医大学学报.docVIP

酪氨酸磷酸酶探针在肿瘤快速检测中的探索 王亚棋1,2，蔡玉龙1，蔡虎1，刘立科1，黎隽1，李剑利2* （1.陕西省医疗器械检测中心，西安，710075；2.西北大学化学与材料科学学院，西安，710127） 摘要：目的 合成出活性酪氨酸磷酸酶探针，运用于肿瘤样品，探寻肿瘤标志物并致力于开发体外诊断试剂进行疾病的早期诊断。方法 优化合成路线，得到文献报道的活性磷酸酶探针，实际运用于肿瘤标志物的选取。结果 缩减实验步骤，成功合成出探针，验证了探针的性能。 结论 利用活性磷酸酶探针，可以为疾病的早期诊断提供出路。 关键词：活性探针；酪氨酸磷酸酶；肿瘤；快速诊断 中图分类号：Q5-33 文献标志码：A 文章编号： Study rapid tumer detection using probes for tyrosine phosphatases Wang Yaqi1,2，Cai Yulong1, Cai Hu1, Liu Like1，Li Jun1，Li Jianli2* （1.Shaanxi Medical Devices Testing Centre，Xian，710075；2. College of Chemistry Materials Northwest University，Xian，710127） Abstract: Objective Synthesize probes for tyrosine phosphatases and exploit in vitro diagnostic reagents (IVD kit)to rapid tumer detection as early as can. Methods Under the guidance of synthetic routes published, we got a probe by a new optimum methode. After the specificity and sensitivity have been proved, the probe have used to find out the biomaker for tumer with clinic samples. Results The probe was synthesized in a new optimum way and its sensitivity and specitficity could meet the needs in testings. Conclusions It is a good idea to evaluate tumer rapidly with IVD kit, the activity-based probes for tyrosine phosphatases should be studied deeply. Key words: Activity-based probe; Tyrosine phosphatase; Tumer; rapide diagnosis ___________________________ 作者简介：王亚棋，男，1972年生，博士，主要从事医疗器械检测工作。 * 联系人。E-mail:sxkeyan@163.com 引 言 酪氨酸蛋白的磷酸化程度是受酪氨酸激酶（PTKs）和酪氨酸磷酸酶（PTPs ）动态平衡所控制的。PTKs 磷酸化酪氨酸残基从而提高其磷酸化水平，而PTPs 水解去除磷酸基降低其磷酸化水平。酪氨酸磷酸化和去磷酸化的动态平衡对于调控细胞中的信号传导是非常重要的[1,2]。 通常情况，PTK和PTP通过动态平衡协同调控包括细胞生长、分化和代谢，细胞周期进化，细胞间应答，细胞迁移，转录，离子通道活性，免疫应答以及细胞凋亡等在内的一系列生理活动[3]。 任何影响这种平衡的因素，不管是遗传的或是环境的，都会导致疾病。有研究表明，PTP过多往往引发癌症，而过低常常与二型糖尿病有关[4]。据此，通过抑制PTK活性紊乱的抗肿瘤制剂已经成功用于临床实践[5]。 然而，调控PTP活性的药物却相当滞后[6, 7]。原因之一就在于，虽然积累了大量的酪氨酸磷酸酶生化结构方面的数据，却缺乏对各种具体酪氨酸磷酸酶不同功能的理解。 人类基因组中至少有107种酪氨酸磷酸酶[8]。它们的催化区都有(H/V)C(X)5R(S/T)氨基酸序列。 绝大部分享有共同的活性半胱氨酸残基用于磷酸化的酪氨酸水解[9]。蛋白或基因的生物功能可以在基因或蛋白水平予以激发或控制。小干扰RNAs (siRNAs)在研究酪氨酸磷酸酶生物功能方面就是一种有效的基因工具。曾通过siRNAs基因敲出，成功知道了LAR、 PTP