8-土壤钩蚴分离及鉴别.pptVIP

土壤钩蚴分离及鉴别 土壤钩蚴分离方法 在流行因素调查上常要对土壤钩蚴进行检查。分离方法有贝氏改良法、筛网平皿分离法以及5％盐水分离钩蚴法。 这次监测选用5％盐水分离钩蚴法对土壤中的钩蚴进行分离检查。 土壤钩蚴分离方法 一、材料 圆形分样筛（20目，直径15cm）、塑料烧杯（500ml）、棉纸、搪瓷盘或不锈钢脸盆（底面稍大于圆形分样筛的底面）、三角量杯或烧杯（500ml）、平皿（直径9cm）、土铲、大镊子、记号笔、保鲜袋、水浴箱（或温箱）、温度计、自来水、氯化钠（Nacl）、解剖镜、显微镜。 土壤钩蚴分离方法 二、步骤 1.用土铲取表层2-3cm土样，在500ml塑料烧杯中定量至300ml刻度（约300g表层土）后放入保鲜袋，注明土样编号，并在登记本上注明相应的取样点、种植物类型、户主姓名、采样份数等基本信息。 2.分样筛筛网面上铺上3层棉纸（棉纸直径22cm），随后倒入样本土，用大镊子将颗粒较大的土压细后将土铺展均匀。 土壤钩蚴分离方法 二、步骤 3.将铺好的分样筛放入搪瓷盘（或不锈钢脸盆）中，加入45℃、5％盐水，至盐水的液面稍没过筛网面的棉纸为止。 4.将搪瓷盘（或不锈钢脸盆）放入水浴箱（或温箱）中，水温控制在45℃左右，放 置1.5小时。 土壤钩蚴分离方法 二、步骤 5.取出分样筛，将搪瓷盘（或不锈钢脸盆）中的水倒入三角量杯（烧杯）中，自然沉淀15分钟。 6.缓缓弃去上清液（倾倒过程不要让水回流），留底部50ml或更少（15-20ml）的液体，倒入平皿中，在解剖镜下镜检有无钩蚴，若有，再在显微镜下进行十二指肠钩虫钩蚴和美洲钩虫钩蚴的鉴别和计数。 土壤钩蚴分离方法 三、注意事项 （1）感染期钩蚴有明显的向温性和向触性，因此清晨太阳初照及雨后天晴（1-2天）是最佳取土时间。土样应在早上10点前采集完毕。 （2） 采集土样的地方在近一段时间内没有喷过杀虫剂。 （3）不要刚下过雨就取，土壤含水较多，影响钩虫卵发育，而且会使分离的水很浑浊，影响镜检。 土壤钩蚴分离方法 三、注意事项 （4）如果分离后沉淀中有絮状沉淀不便观察，建议再采取以上分离步骤，在45℃、5%的盐水中分离20 min后进行观察。 （5）选择钩虫感染较高的家庭，而且施粪肥时间在10-30天之间取土样，效果较好。 （6）泥土样本宜选在有代表性的作物（如蔬菜、红薯、玉米等）种植地，取其深度为2-3cm的泥土为样本。泥土样本不宜过干也不宜过湿，以含水量约15％为宜。 土壤钩蚴分离方法 土壤钩蚴分离方法 土壤钩蚴分离方法 土壤钩蚴分离方法 常见幼虫的鉴别 杆状蚴的鉴别 显示类圆线虫——口腔短 显示类圆线虫中部——明显的生殖原基 显示小杆线虫——食管的三个膨大部 丝状蚴的鉴别 粪类圆线虫丝状蚴——食管占体长1/2 粪类圆线虫丝状蚴——无鞘 粪类圆线虫丝状蚴——尾端凹陷 结节线虫属丝状蚴——肠管腔弯曲显著 结节线虫属丝状蚴——鞘逐渐变细呈细长尾部 毛圆线虫属丝状蚴——鞘突然变细、尾短 ? 十二指肠钩虫 （三期幼虫） 美洲钩虫 （三期幼虫） 虫体长度（mm） 0.648 0.548 头端 扁平较大，中间微凹 圆形，较小 口矛（食道矛） 透明，两矛间距宽 黑色，明显，两矛间距窄 咽肠联接处 多有半透明横带 有空白横带 鞘膜横纹 不明显 明显 十二指肠、美洲钩蚴鉴别要点 十二指肠钩虫丝状蚴——有鞘，食道矛不明显 美洲钩虫丝状蚴——有鞘，食道矛明显 十二指肠钩虫丝状蚴尾部——鞘膜横纹不明显 美洲钩虫丝状蚴尾部——鞘膜横纹明显