PRRSV非结构蛋白NSP11抑制Ⅰ型干扰素表达分子机制的初步研究.doc

猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP12基因的克隆和表达* 林丽1 洪君昊1 江云波** 肖少波 陈焕春 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，华中农业大学动物医学院 摘要：通过RT-PCR方法，克隆获得大小为462bp的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的非结构蛋白NSP12基因。将其克隆到pGEM-T载体上，测序正确后进一步亚克隆到原核表达载体pGEX-KG中，构建重组表达质粒pKG-NSP12。将其转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导表达后，重组菌体裂解物经SDS电泳可检测到分子量约为44kDa的重组融合蛋白，其表达量占总菌体蛋白量的47.5%。Western-blot试验结果显示表达的重组融合蛋白GST-NSP12能够较好的与PRRSV阳性血清发生特异性反应。PRRSV NSP12基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒，NSP12基因，克隆，表达 中图分类号： 文献标识码：A 文章编号： 猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）于1987年首次在美国南部发现并报道，随后迅速流行于全美。随之加拿大、德国、荷兰等北美洲及