表达一亚麻酸的无筛选标记转基因大豆的鉴定-热带亚热带植物学报.PDF

热带亚热带植物学报 2006，14(6)：460-466 JournalofTropicalandSubtropcialBotany 表达 一亚麻酸的无筛选标记转基因大豆的鉴定 张秀春 ，林俊扬2，彭 明 ，郭丽琼 1】，林俊芳 (1．中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所，海 口571101；2．福建省莆田市农业科学研究所，福建莆田351100 3．华南农业大学食品学院生物工程系，广州510640) 摘要：对所获得的9株无筛选标记基因的T代莆豆 8008转基因大豆的T：代进行了分析。PCR和 Southern杂交检测 表明标记基因已不存在于转基因株系中，同时 目的基因以纯合或者杂合状态存在于部分株系中，除草剂抗性分析也表 明这些转基因株系已不再具有抗除草剂的能力。Northern杂交检测表明△．脂肪酸脱氢酶基因在转基因株系中可以转 录。GC分析表明其中6个转基因植株富含 GLA。 关键词：大豆；△．脂肪酸脱氢酶基因；无标记基因；^y．亚麻酸：Southernblot；Northernblot；GC 中图分类号：Q943．2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005—3395(2006)06—0460—07 CharacterizationofM arker—freeTransgenicSoybeanswithA6-fatty AcidDesaturaseGeneExpressing —linolenicAcid ZHANG XiU-chun，LIN Jun—yang，PENG Ming， GUO Li—qiong，一， LIN Jun—fang， (1．ChineseAcodemyofTropicalagriculturalSciences，Haikou571101，China；2．PutianCity’SInstituteofAgriculturalSciences，Putian351100 China：3．DepartmentofBioengineering,CollegeofFoodSciences，SouthChinaagriculturalUniversity，Guangzhou510460，China) Abstract：Nine linesofT2generation ofmarker-flee transgenic soybeansofPudou8008withA6-fattyacid desaturasegenewerecharacterized．PCRandSouthernblotindicatedthattheselectivemarkergene(bar)hadbeen removedflom sometransgenicsoybeanprogenies，whileA6-fattyaciddesaturasegenewasstillinsomeprogenies ofthesetransgenicsoybeanlines．Northern blotshowedthattheA6-fattyaciddesaturasegenecouldbetranscribed inthemarker-fleertansgenicsoybeanlines．Gaschromatographicanalysisshowed thatsix rtansgenic soybean linescouldproduce^y—linolenicacid． Keywords：Marker-fleertansgenicsoybean；A6-fattyaciddesaturase；^y—linolenicacid；Southern blot；Northern blot；GC ^y一亚麻酸 (^y—linolenicacid，GLA)是一种多不饱 是 ^y一亚麻酸生物合成 的关键酶，它 以亚油酸为底 和脂肪酸 ，分子式 C。H加O，化学名称为 6,9，12一十 物 ，在 C6和 C7位之 间脱氢形成 ^y一亚麻酸 ，然后通 八碳三烯酸 ，在碳链的第 6、9、12位各有一个双键。 过碳链延长和进一步脱氢作用形成花生四烯酸、前 由于 ^y一亚麻酸对人体的激素调节和在人体脂肪酸 列腺素类和白三烯类生