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ABSTRACTImmunogIobulinE(IgE),asasecreto叮immunoglobulin,playsakeyroleinh啪aIlalle唱icresponses.Nomlally,IgEispresentinsmall锄outsinhumallbloodsemm,ho、Ⅳever,IgElevelsincreaseinpatients谢thalIe玛ic嬲tIl】na,atopicde咖atitisaIldotherimmunede矗ciency-relateddjseaSes.Therefore,it’simponaIltfordiIlicaldiagnosticstodevelopeas呻le,r印id锄dsenSitiveme山odfort11edetectionofIgE.C伽曲illingnuo心Scencespec嘶scopyanda肚姐erposses咖glliglls唰丘c时,t11isaniclee嘲bliShedanuoreScent印t蠲enSorb嬲edontlleprincipleofnIIorescencereSonallce锄erg),仃{msfe“FI己ET)todetectimmunodobulinE(IgE).Inthisanicle,CyaIlinedyes—Cy5锄dhydmph订icc曲onnanomaterials—grapheneoxide(GO)werechosenaSthenuoreScentenergydonorandreceptorrespectiVeIy.Theanti—IgEapt锄erwhosetagged埘mCy5collldbe删ilyabso毗donmesurf砬eofGOvia兀-兀conjugateaccumul撕one仃ect.ResonaIlceene珏搿tmsferbe铆eenCy5andG0,couldquenchtllenuorescenceofCy5.Withtheta唱etproteinIgEadded,itcompetedwithGOforbindingto印t锄er.111llS,也enuore:scemsi印alsofCy5re咖red.Intheexperimentalprocess,wefirstlyuSedtheThree—Dimension越ExcitationEmissionmatrixFIuorescenceSpectrophotometer(3D—EMM)toanalyzethepropeniesofCy5tagged印tamer,using633nma11d675nmastheexcitationandemissionWaVelengtll,respectiVely.ThekindofquencherS,incubationtemperatureaIldincubationtimewereoptimized.Theresultssho、vedthattheh追hestnuoreScencesignaJresponSewaSobtainedusing00asthequencheraRerincubationin1xPBS(pH7.4,CM92+1mmol/L)at37℃for30min.Undertheoptimizedconditions,Jinearrangeof0.05—1O姗oi/LwaSobtained,wit}ladetectionlimitof1pmol/L.IgGandHASwereselectedforthespecificityValidationofthepresentmethod.ThereSultindicatedthat,bothshowedlownuorescenceresponse,whichindicatesahi曲selectiVityandspecificityofthismethod.FinaUy,weappl.edtheestablishedmethodtodetecttheIgEinahumanbloods帅ple,andusedtheclassicalELlSAmethodtoveri匆thetestresuIt,whichexhibitedagoodconsistency.Weconcludethatthepresentmethodise伍cient,rapid,sensitiVeandhasgreatpotentialinactIJalclinicalapplications.KeyWords:Apt锄ers,IgE,Fluorescentsensor,G0,DetectiOn万方数据目录1前言..11.1核酸适配体.11.1.1核酸适配体的筛选21.1
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