基于透射电镜和代谢组学的纳米颗粒毒性研究-化学专业论文.docxVIP

上海交通大学硕士学位论文 上海交通大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 Dissertation Submitted to Shanghai Jiao Tong University for the Degree of Master Transmission Electron Microscopy- and Metabolomics-Based Nanotoxicology Research Candidate ：Yang Bo Student ID ：1114049003 Class ：B1140491 Supervisor ：Associate Prof. Chengyu Jin Associate Prof. Yumin Liu Academic Degree Applied for ：Master of Science Major ：Chemistry Affiliation ：Instrumental Analysis Center Date of Defense ：01/08/2014 Degree-Conferring-Institution ：Shanghai Jiao Tong University 上海交通大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本 文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。 本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 2014 年 2 月 26 日 上海交通大学 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版， 允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫 描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密□，在 年解密后适用本授权书。 本学位论文属于 不保密□。 （请在以上方框内打“√”） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期：2014 年 2 月 26 日 日期： 2014 年 2 月 26 日 基于透射电镜和代谢组学的纳米颗粒毒性研究 摘 要 本文目的是为了提供纳米颗粒生物毒性机制研究的有效方法，以及提供评价 常用纳米颗粒生物安全性所需要的数据，并为其后续毒性机制研究的计量选择以 及生物安全性指标识别提供依据。本研究主要采用透射电镜研究不同粒径、不同 浓度的纳米颗粒对细胞亚结构的影响，及利用基于 GC/TOFMS 的代谢组学，分 析纳米颗粒对细胞代谢水平的影响，为建立下游代谢物变化与信号通路变化的关 系提供有效数据，以期对其毒性效应的全面理解。选择 2 种应用比较广泛的典型 纳米材料，金属氧化物纳米颗粒二氧化钛和高分子纳米颗粒聚苯乙烯检测了两种 纳米材料对小鼠成纤维细胞 (L929 cell line) 的毒性效应。透射电镜观察研究结 果表明，L929 细胞亚细胞结构受损程度随纳米颗粒浓度增加和作用时间增长而 增加，参照细胞结构主要为细胞内泡状结构和线粒体等。同时，浓度效应对纳米 颗粒毒性的影响大于时间效应。基于代谢组学的二氧化钛纳米颗粒毒性研究中， 有 7 条氨基酸代谢通路是被严重干扰的 (impact-value 0.10)。其中，有 10 个明 显变化的氨基酸。这些结果表明受干扰的氨基酸在纳米 TiO2 引起的毒性效应中 起到重要作用。与前期研究结果结合，纳米 TiO2 可能是通过引发氧化应激、能 量损伤及 DNA 和 RNA 受损而导致毒性效应。基于代谢组学的聚苯乙烯纳米颗 粒毒性研究中，发现 13 个在浓度梯度中均有明显变化的代谢物。分析表明，无 论浓度高低，聚苯乙烯纳米颗粒主要通过扰动细胞内糖代谢通路和氨基酸代谢通 路而导致毒性效应，并持续抑制核酸合成通路。同时，研究结果表明生物型透射 电镜和基于 GC/TOFMS 的代谢组学方法对纳米颗粒毒理学研究的有效性。 关键词：二氧化钛纳米颗粒、聚苯乙烯纳米颗粒、毒性、透射电镜、代谢组学、 GC/TOFMS I Transmission Electron Microscopy- and Metabolomics-Based Nanotoxicology Research ABSTRACT As nanotechnology develops, nanomaterials have been widely applied in daily life and subsequent problem on the poten