遗传学课件第6下章 离体繁殖.pptVIP

第六章　离体繁殖 第一节　离体繁殖 　1、离体繁殖的概念与特点 　2、再生植株的途径 　3、基本程序 4、离体快繁中主要问题 5、商业化离体快繁参数的估计 第二节　无病毒苗的生产 　1、意义 　2、脱除病毒的原理与方法 　3、植物脱毒程序 第三节　人工种子 　1、人工种子的概述 　2、繁殖体种类及其培养技术 ３、人工种子制备 目的：将增殖体扩大繁殖。 1、试管苗的生长环境 无菌 弱光 恒温 高湿 （100％） 2、试管苗的特点（弱点）－－形态解剖和生理功能 1）形态解剖方面 （1）根－弱小、无根毛 （2）叶 ①叶的角质和蜡质层不发 达。 ②无表皮毛，保水和反光能 力差。 ③叶细胞结构疏松。 ④叶气孔突出，张大。 ⑤叶存在排水孔。 　　　　　　　　　　 3、克服试管苗弱点，提高其移栽成活率的措施 ①提高瓶苗的质量，提高抗逆性； ②创造组培苗适宜的炼苗环境 ③移栽时的注意事项。 ①提高瓶苗的质量，提高抗逆性； 培养瓶生壮苗、理想的生根配方和生根环境的调控。 加入生长控制剂，如多效唑， B9， CCC，其作用是使苗粗壮，叶绿素增加。 ②创造适宜的炼苗环境 将瓶盖打开，打破无菌环境，湿度逐渐下降，光照逐渐加强，使之形成新的功能强的根和叶片。一般炼苗时间为10—30D。 ③移栽时应注意的问题 A：防止菌类滋生 　 ①苗底部培养基要清洗干净 　 ②杀菌剂处理苗的根部 　 ③定时用杀菌剂处理种植基质 　常用杀菌剂：KMnO4,百菌清、 多菌灵、托布津，使用浓度0.1％ （１）植物类型； （２）外植体的生理状态及发育年龄； （３）培养基组份的影响； （４）培养条件； （５）每代的培养时间。 2、玻璃化：当植物材料不断地进行离体培养时有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明状、水渍状的现象，或是出现肿胀、失绿，叶片皱缩卷曲、脆弱易碎等情况，称为玻璃化。 功能表现：表现为光合能力和酶活性降低，组织畸形，器官功能不全，分化能力降低， 所以很难继续用作继代培养和扩大繁殖的材料；生根困难，移栽后也很难成活。 1）玻璃化产生的因素 － 琼脂和蔗糖浓度与玻璃化成负相关，琼脂或蔗糖浓度越高，玻璃苗的比率越低 。 －许多学者证明培养基中BA浓度和培养温度与玻璃化成正相关，BA浓度越高或培养温度越高，玻璃苗比率越大。 －Hakkart F. A. 等认为玻璃苗是培养瓶内气体与外界交换不畅造成的。密闭的封瓶口材料是导致玻璃化的原因之一。 － 培养基中高的含N量，特别是高的氨态N，也是导致玻璃化的因素。 －不同的外植体，其玻璃化程度不一样，以留兰香基部节段所形成的试管苗玻璃苗严重，中部茎段次之，茎尖最好（柴明良）；重瓣丝石竹中部茎段出现玻璃苗较多，基部茎段较少，茎尖没有（郭达初）。郭东红等（1989）认为瑞香茎尖外植体大小与玻璃化相关，茎尖外植体越小，出现玻璃苗比率越大。 2）防止和克服玻璃化的措施 两个“增加”：增加琼脂浓度；增加蔗糖含量； 　　两个“增强”：增强容器通风；增强光照（自然光照）； 　　两个“加入”：加入渗透剂；加入ABA； 　　一个“减少”：减少培养基氮含量 五、商业性离体快繁需要估算的参数 　 试管育苗需要有一定的设备和厂房（投资较大），并要求具有成熟的技术条件，否则工作就无法开展。另外，市场因素至关重要，否则只会徒劳无功 。 1、市场因素 －决定苗木的生产规模和效益 2、技术因素－决定苗木的质量和成本 　 污染率，继代代期，增殖率和生根率，继代次数，变异率，培养基配方，环境条件控制。 3、其它因素：如劳动力，基础设施，投资规模等 防治方法：目前生产上还没有特效药可以彻底除去病毒。 抗病毒育种（常规和基因工程）步履艰难。 1、材料的准备 1）选用生长健壮，遗传性一致的品种为材料。 2）了解该植物体内具有的病毒种类及危害程度。 3、无病毒植株的鉴定 1）指示植物鉴定法； 2）抗血清鉴定法； 3）PCR技术； 4）电子显微镜检测法。 2、人工种子研制的意义 人工种子的结构 人工种子分类 以体细胞胚为繁殖体的人工种子 以器官（芽、鳞茎、球茎等）为繁殖体的人工种子 不同繁殖体成苗所需时间及成株率 实验室人工种子制作 常用的人工种皮材料 人工种子制作程序 马铃薯试管块茎人工种子 试管块茎人工种子田间种植 繁殖体 人工种皮 人工胚乳 繁殖体：离体培养产生的胚状体、球茎、茎段、芽、块茎