坦布苏病毒E蛋白结构域I∕II蛋白免疫保护效果.pdfVIP

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2019-03-27 发布于广西
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坦布苏病毒E蛋白结构域I∕II蛋白免疫保护效果.pdf

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江苏农业学报(ＪｉａｎｇｓｕＪ.ｏｆＡｇｒ.Ｓｃｉ.)ꎬ２０１７ꎬ３３(２):３７９~３８３ｈｔｔｐ:/ / ｗｗｗ.ｊｓｎｙｘｂ.ｃｏｍ３７９赵冬敏ꎬ刘宇卓ꎬ黄欣梅ꎬ等. 坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白免疫保护效果[Ｊ].江苏农业学报ꎬ２０１７ꎬ３３(２):３７９￣３８３. ｄｏｉ:１０.３９６９/ ｊ.ｉｓｓｎ.１０００￣４４４０.２０１７.０２.０２２坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白免疫保护效果赵冬敏ꎬ　刘宇卓ꎬ　黄欣梅ꎬ　韩凯凯ꎬ　杨　婧ꎬ　刘青涛ꎬ　毕可然ꎬ　李　银 (江苏省农业科学院兽医研究所/ 国家兽用生物制品工程技术研究中心/ 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室ꎬ江苏南京２１００１４) 　　摘要:　为了探讨原核表达的坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白对于坦布苏病毒感染的免疫保护作用ꎬ利用ＩＰＴＧ诱导重组大肠杆菌表达坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白ꎬＡｎｔｉ￣ＦＬＡＧＭ２ＡｆｆｉｎｉｔｙＧｅｌ纯化后进行ＳＤＳ￣ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ꎮ 经ＳＤＳ￣ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ꎬ纯化后坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白仅有单一目的条带ꎮ 免疫组小鼠血清ＥＬＩＳＡ效价均达４.６７±０１１(ｌｇ１０)ꎮ 攻毒保护试验结果表明ꎬ免疫组小鼠体质量在攻毒９ｄ后高于对照组ꎬ荧光定量ＲＴ￣ＰＣＲ检测结果显示ꎬ攻毒后免疫组小鼠脑、肝脏、脾脏组织中坦布苏病毒核酸含量均低于对照组ꎮ 表明使用原核表达的坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白免疫可诱导产生高水平抗体ꎬ并提供良好的免疫保护力ꎬ为开发有效的坦布苏病毒亚单位疫苗提供依据ꎮ 关键词:　坦布苏病毒ꎻ Ｅ蛋白ꎻ 结构域Ｉ/ ＩＩꎻ 免疫保护＋中图分类号:　Ｓ８５２.６５９.６　　　文献标识码:　Ａ　　　文章编号:　１０００￣４４４０(２０１７)０２￣０３７９￣０５ＩｍｍｕｎｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆＴｅｍｂｕｓｕｖｉｒｕｓＥｐｒｏｔｅｉｎｄｏｍａｉｎｓＩａｎｄＩＩＺＨＡＯＤｏｎｇ￣ｍｉｎꎬ　ＬＩＵＹｕ￣ｚｈｕｏꎬ　ＨＵＡＮＧＸｉｎ￣ｍｅｉꎬ　ＨＡＮＫａｉ￣ｋａｉꎬ　ＹＡＮＧＪｉｎｇꎬ　ＬＩＵＱｉｎｇ￣ｔａｏꎬ　ＢＩＫｅ￣ｒａｎꎬ　ＬＩＹｉｎ (ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＪｉａｎｇｓｕＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ/ ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＢｉｏｌｏｇｉｃａｌｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ/ ＮａｔｉｏｎａｌＣｅｎｔｅｒｆｏｒＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＢｉｏ￣ｐｒｏｄｕｃｔｓꎬＮａｎｊｉｎｇ２１００１４ꎬＣｈｉｎａ) 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ:　Ｔｈｅｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙｏｆｔｈｅｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃａｌｌｙ￣ｅｘｐｒｅｓｓｅｄＴｅｍｂｕｓｕｖｉｒｕｓＥｐｒｏｔｅｉｎｄｏｍａｉｎｓＩａｎｄＩＩｗａｓｔｅｓｔｅｄｂｙＳＤＳ￣ＰＡＧＥａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＴｅｍｂｕｓｕｖｉｒｕｓＥｐｒｏｔｅｉｎｄｏｍａｉｎｓＩａｎｄＩＩｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉａｎｄｉｎｄｕｃｅｄｂｙＩＰＴＧ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｏｎｌｙａｓｉｎｇｌｅｔａｒｇｅｔｂａｎｄｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄａｆｔｅｒｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ.Ｔｈｅｔｉｔｅｒｓｏｆａｎｔｉｂｏｄｙｏｆｉｍｍｕｎｉｚｅｄｇｒｏｕｐｒｅａｃｈｅｄ４.６７±０１１(ｌｇ１０). Ｔｈｅｗｅｉｇｈｔｏｆｉｍｍｕｎｉｚｅｄｇｒｏｕｐｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｆｒｏｍｔｈｅ９ｔｈｄ