分散液液微萃取—高效液相色谱法测定食品中农药的跟量.doc

分散液液微萃取—高效液相色谱法测定食品中农药的含量 张良温 指导教师:翦英红 (吉林化工学院 环境与生物工程学院 环境科学0501班，吉林 吉林132022） 摘要：本实验采一种较新的提取分析食品中农药（以阿特拉津为例）残留的方法——分散液液微萃取—高效液相色谱法。分散液液微萃取条件优化后为：水样体积：6mL；萃取剂：氯苯，30.0μL；分散剂：丙酮，1.0mL；离心时间：4min，盐度为4.5%，pH=5.5。最佳条件下，富集因子(EF)和萃取回收率(ER)分别介于105.71-129.19和45.81% - 58.28%。阿特拉津的最低检出限为1μg/L。 水样中阿特拉津在加标浓度为40、60、80 μg/L的相对回收率分别为50.72% - 52.95%，45.81% - 52.16%和51.68% - 58.28%。此种方法测定食品浸出液中阿特拉津方便，快速。 关键词：分散液液微萃取；阿特拉津；高效液相色谱法；萃取回收率 阿特拉津(atrazine)又名莠去津，化学名：为2-氯4-乙氨基-6一异丙氨基．1，3，5-三嗪，系均三氮苯类农药，常温下，阿特拉津的纯品是无色、无臭晶体，，分式：C18H14ClN5，熔点173～175 ℃，在25℃ 时，蒸汽压为38．5 μPa，水中溶解度为33 mg／L。在微酸及微碱介质中稳定，但在高温下，碱和无机盐可将其水解为无除草活性的羟基衍生物[23]。 阿特拉津是～种在世界范围内广泛使用的中等偏低毒性除草剂，曾被认为是生态安全的除草剂，但由于使用量大、残留期长，农田施用后随着地表径流、淋溶、沉降等多种途径进入地表水和地下水，阿特拉津的残留物在世界许多国家和地区的地表水和地下水中已有检出。近来不断有阿特拉津污染事件的报道，已有的研究证明阿特拉津对动物的生殖功能有极大的影响，被世界野生动物基金会列为环境荷尔蒙(内分泌干扰剂)的可疑物质，有扰乱内分泌的作用，是人类潜在的致癌物。由于阿特拉津被认为是一种最具污染力的农药，目前，包括德国、法国、瑞典在内的欧洲7个圈家禁止使用。 分散液液微萃取(DLLME)技术由于其萃取时间短、操作简便，是水样分析的前处理方法之一，它建立于三相溶剂体系。在分散剂的作用下，萃取剂以微小液滴的形式分散在样品溶液中，形成乳浊液，从而对溶液中的分析物进行微萃取。采用离心，可将萃取剂沉积于溶液底部，与溶液分离。本文将分散液液微萃取技术应用于食品水样中痕量阿特拉津的萃取、富集，确定了水样中阿特拉津的最佳DLLME条件，并最终建立了阿特拉津的分散液液微萃取一高效液相色谱测定方法。 1 实验部分 1．1 试剂 阿特拉津，丙酮、乙腈、甲醇、氯苯、四氯乙烯、四氯化碳，均为色谱纯。氯化钠(分析纯)，氢氧化钠（分析纯），盐酸（优级纯）。 1．2 仪器 LC一20AT高效液相色谱仪：手动进样器、柱加热器、Primo／PrimoR多用途台式高速离心机，10 mL戴帽锥形玻璃离心管，50 L微型注射器，2．00 mL注射器，1mL移液管，2mL试样瓶，0.22μ纤维滤膜，吸耳球，1L大烧杯， 250mL量筒便携式pH计。 1.3 水样中阿特拉津的DLLME技术 6．0 mL水样加入锥形玻璃离心管中。1．0 mL分散剂和30μL萃取剂混合均匀后，用2．00 mL注射器快速注入离心管中。轻轻摇晃后，离心管内的溶液马上乳化、混浊，并最终产生乳浊状溶液。这主要是溶液内形成了萃取剂小液滴，阿特拉津萃取到小液滴中。在4000 rpm转速下离心10min，萃取剂液滴沉积到离心管底部，形成内含阿特拉津的沉积相。移取10μL沉积相，注入HPLC系统中进行分析。 1.4 色谱条件 流动相：甲醇：水(80／20，v／v)，流量1．0mL/min；色谱柱：Diamonsil C18，柱温30℃； 检测波长：225nm；进样量：10 μL。 1.5 实验水样制备 购买于早市的黄瓜，西红柿，小白菜，分别取以上三种蔬菜各250g分别放置于三个1L大烧杯中，加水500mL浸泡，分别在10min，30min，60min，120min，取水样进行萃取分析。 2 结果与讨论 2.1 DLLME萃取条件的优化 2.1．1 萃取剂及体积的确定 DLLME技术所需要的萃取剂一般需要满足以下几点要求：(1)有机溶剂的密度大于水。(2)萃取剂在水中的溶解度要尽可能小。(3)萃取剂对分析物有一定的萃取行为。(4)萃取剂能与分散剂混溶。(5)溶剂峰与目标峰在适合的色谱条件下可以完全分离。依据这些原则，本实验考察了氯苯、四氯乙烯、四氯化碳三种萃取剂对阿特拉津的萃取效率(图1)。结果表明：无论是富集倍数，还是萃取回收率，氯苯的萃取效率比其他萃取剂均高。