天瑞_液相色谱仪_邻苯二甲酸酯类检测流程_PAES测定方法.docVIP

PAGE 1 PAGE 4 邻苯二甲酸酯类检测流程 样品前处理： ㈠ 索氏方法 取5 ~ 10g样品，破碎至3mm×3mm，混匀，精密称取2.0000g，置于用滤纸叠成的萃取筒中，加入乙醚量为：提取器虹吸一次，再倒入提取器的三分之二，于45℃的水浴中，索氏萃取8小时，将萃取液转移到蒸发皿中，水浴挥干，残渣用甲醇定容于25.00ml容量瓶中，摇匀，用0.45μm的有机滤膜过滤，存于玻璃样品瓶中，待测。 注：，必要时可以用二氯甲烷溶解蒸发皿中的提取物，然后用甲醇定容。主要目的是将蒸发皿中的提取物溶解并转移至容量瓶中。 ㈡ 超声萃取方法 取5 ~ 10g样品，混匀，精密称取2.0000g，置于50ml的具塞平底烧瓶中，加入25.00ml正己烷(移液管或移液枪移取)，塞上盖子后用生料带（聚四氟乙烯膜）封口，室温超声两小时，用0.45μm的有机滤膜过滤，存于玻璃样品瓶中，待测。 （三）微波萃取法 取5 ~ 10g样品，破碎至3mm×3mm，混匀，精密称取0.5000g，置于微波萃取罐中，加入15ml乙酸乙酯，100度条件下微波处理30min，功率为500w，转移至蒸发皿后挥干，残渣用甲醇定容于25.00ml容量瓶中，摇匀，用0.45μm的有机滤膜过滤，存于玻璃样品瓶中，待测。 注：对于比较脏的样品需要进行净化处理，特别是对于皮革材质的样品，经过微波处理后需要经过净化处理。 净化柱：净化柱为hahnschliff(规格：220*15mm)，由4g硅胶和1cm硫酸钠组成。硅胶在使用前加入10%的水使其失去活性（将硅胶放在烧杯中，加适量水，然后在室温和大气压下旋转蒸发1小时，此硅胶可以再室温下储存密封玻璃瓶内）。 净化步骤：先用15ml正己烷润洗净化柱，弃去以上过柱液，将提取液通过净化柱，控制流速为0.5滴/S，再用20ml乙醚冲洗萃取瓶，冲洗液也转移到净化柱中。洗脱液中再加入50ml乙醚（分两次加入）。浓缩收集液至干，用甲醇定容至25ml，过滤，待测。 色谱条件： 流 动 相：乙腈：水 色 谱 柱：AQ-C18 检测波长(UV)： 224nm 柱 温：30℃ 流 速：1.0 ml/min 进 样 量：10μl 梯度模式（针对邻苯7p） 时间（min） 水（A） 乙腈（B） 0 25 75 5 15 85 15 0 100 25 0 100 26 25 75 梯度模式（针对邻苯16p） 时间（min） 水（A） 乙腈（B） 0 30 70 5 10 90 10 0 100 18 0 100 19 50 50 28 50 50 30 30 70 测试： 流动相准备： 取色谱纯乙腈和超纯水，在溶剂过滤器中用0.45μm的有机滤膜过滤，再超声10~20min脱气，并放至溶剂托盘内（LC-CO310柱温箱）。 标准品配制 准确称取标准物质100mg左右，用甲醇溶解并转移至100ml容量瓶中，定容至刻度线，配制成1000ppm的储备液。移取一定量的储备液，置于25ml容量瓶，配制成所需浓度的标液。 上机测试： （1）开机a. 接通稳压器的电源，依次打开LC-P310泵、LC-UV310紫外检测器、LC-CO310柱温箱，待检测器自检结束波长显示254nm时，打开电脑主机、显示器、打印机。 b. 打开LC-P310恒流泵后，逆时针转动排空阀（约30°），用随机配备的30ml注射器抽出液体10～15ml（或者设置泵界面上按钮，使其条件至冲洗purge状态，任其冲洗直至泵自动停止），再将排空阀恢复至原位；每天都要做。c. 打开LC-WS310液相色谱工作站窗口。 （2）平衡系统 在工作站相应的项目下分别设定好所需要的值： 波长：224nm 柱温：30℃ 流速按下面不同模式处理 平衡模式：每次以0.1ml/min的增量加大流速至1.0ml/min，以流动相冲洗系统至基线平稳（约15min~30min），观察泵压力稳不稳定，压力波动不能超过0.1Mpa，并注意观察管路连接、柱接口及泵头处是否漏液，如漏液应予以排除。 （3）进样 a. 先用色谱纯甲醇清洗注射器，再用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取10μl。 b. 将进样阀手柄转动至Load位置，将注射器针完全插入进样阀入口中，平稳地注入试样溶液，除另有规定外，让注射器留在进样阀上，将进样阀手柄快速转动至Inject位置，系统将自动运行，采集数据并记录图谱。 c. 将注射器从进样阀中拔出。 d. 先用甲醇再用试样溶液清洗注射器后，按以上程序继续进样，直至完成。 （4）数据处理和打印 （5）清洗系统和关机 a. 数据采集完毕后，关闭氘灯，继续以工作流动相冲洗30min。 b.