ATP荧光快检：生物传感器的应用不是梦——访沈阳中科靓马生物工程有限公司技术总监金振华教授.pdfVIP

维普资讯 盛蚺I9【l 圜彝】冒嘲圈0【 检验检测 T 光快检一● 生物传感器的应用不是梦 访沈阳中科靓马生物工程有限公司技术总监金振华教授 口本刊记者 马永娇 地球土壤样本的ATP进行了检测，并分 中ATP的数量。以样品中细菌检测为例， 别在 日后探测月球、火星是否存在生命 细胞数越多，ATP数量也越多，发出的荧 中得到应用。基于虫光素酶的ATP检测 光就越强。也就是说 在特定条件下， 商业应用则始于80年代后期。最初 是 荧光值与ATP的数量是呈线性相关的； 通过养殖萤火虫幼虫获得虫光素酶 随 而且，荧光值很容易通过光度计准确计 着基因工程技术的发展和应用，科学家 量。所以，在排除样品中非细菌ATP干扰 从萤火虫细胞中取出编码萤火虫酶的 的情况下，只要得到相对荧光值和细菌 基因，并将其引入细菌细胞。这样 通过 细胞数的关系曲线，然后根据纯ATP的 生物发酵在短短的十几个小时内就可以 相对荧光值与细胞数的标准 曲线，就能 得到大量的虫光素酶。2003年沈阳中科 快速确定样品中细菌的细胞数。 靓马引入 由中科院发育所金振华教授发 ATP荧光法是根据萤火虫发光原理 明的 含荧光素酶基因的新型菌株及虫 ATP,~缝系辘 开发的快速检测技术。萤火虫会发光是 光素酶的生产 专利项 目，经过几年的 缓 部髂及葜俸 由于它能合成将化学物质的化学能转 产业化探索，终于在2005年后开始批量 目前，依据萤火虫发光原理并用于 变为光能的生物催化剂 萤火虫荧光素 生产拥有 自主知识产权的虫光素酶、虫 生物量、酶和代谢产物检测的应用系统 酶 (简称虫光素酶，luciferase)、虫荧光 荧光素制剂，并于2007年完成相关检测 已经有很多种。尽管各类检测系统的应 素 (D—luciferin)以及 P(三磷酸腺苷， 产品的配套，实现了食品样品的细菌总 用目的、操作方法、样品来源各不相同， 所有细胞生物都能产生的能源物质)。在 数快速检测。 但在组成上都包括以下几个部分。 有氧条件下 虫荧光素酶催化虫荧光素 1．试剂系统 生成氧化荧光素并发出荧光。如果具备 蒸于 韵 试剂系统包括促使荧光反应发生 上述条件，即使在萤火虫体外的系统也 ATP菱巍 理 所需的所有反应试剂和ATP有效提取试 可以发出荧光。 虫光素酶只有在ATP存在时才会催 剂。具体包括体细胞裂解试剂组、细菌 早在20世纪50年代末，美国太空总 化虫荧光素发生反应，并产生荧光。因 细胞裂解试剂组和荧光反应试剂组。体 署就已经利用萤火虫荧光素酶建立了快 此，如果在虫光素酶、虫荧光素过量的 细胞裂解试剂组可以专一有效地裂解 速超微量ATP检测技术，6O年代末曾对 情况下 萤光强弱将只取决于反应系统 样品中的非细菌细胞 (体细胞)并释放 46食品安全导刊