分子遗传学-转录和翻译.ppt

* * * * 大肠杆菌的rRNA有三种：5S、16S和 23S，大小分别为120、1541、2904个核苷酸。大肠杆菌的基因组有7个rRNA的转录单元，分散在基因组的不同位置。每个转录单元由16SrRNA、23SrRNA、5SrRNA和几个tRNA基因组成。转录原初物在RNaseⅢ和 RNaseE的作用下切割为16SrRNA、23SrRNA、 5SrRNA的前体物， 前体物两端的多余序列需要进一步由核酸酶切除后才成为成熟的rRNA分子。 * * 真核生物的tRNA基因也是成簇排列的，并且被间隔区分开。tRNA基因的转录是由RNA聚合酶3负责的，转录产物为4.5S或者稍大一些的tRNA前体，相当于100核苷酸左右。成熟的tRNA为4S，70~80个核苷酸。前体分子的tRNA的5‘端和3’端都有附加的序列，需要由核酸内切酶和外切酶切去。 真核生物tRNA前体的3‘端不含CCA序列，成熟的tRNA分子的3’端的CCA序列是后来加上来的，这与原核的tRNA前体的加工是有区别的，另外tRNA前体也要经过修饰包括甲基化等。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2012年2月20日星期一 * 成都医学院检验医学院 肽链氨基末端和羧基末端有切除和/或化学修饰 翻译过程中，原核生物的N-末端的第一个氨基酸总是甲酰蛋氨酸；真核生物的是蛋氨酸。细胞内的脱甲酰基酶或氨基肽酶可以去除 （一）、新生肽链经历翻译后修饰 2012年2月20日星期一 * 成都医学院检验医学院 水解加工包括多蛋白水解加工和内含肽的剪接 （1）、蛋白水解加工可产生多种肽链 （2）、内含肽切除导致外显肽连接 2012年2月20日星期一 * 成都医学院检验医学院 氨基酸残基的化学修饰有多种形式 （1）、甲基化和乙酰化修饰 （2）、蛋白质糖基化 （3）、某些蛋白质加入异戊二烯基团 （4）、结合蛋白质加入辅基 （5）、大多数蛋白质有二硫健的形成 2012年2月20日星期一 * 成都医学院检验医学院 多肽链通过分步反应快速地进行折叠 辅助蛋白参与：二硫键异构酶、脯氨酰顺-反异构酶和分子伴侣蛋白等 分子伴侣参与蛋白质折叠 细胞内的分子伴侣可分为两大类，即按照与核糖体结合与否 （二）、折叠是肽链高级结构形成的过程 2012年2月20日星期一 * 成都医学院检验医学院 （三）、亚单位聚合形成多亚基蛋白质 * * 前面我们讲过，看到一个新东西首先要问自己三个问题，Why?What?How?通过前面学习我们知道分子遗传学的研究是以中心法则为主要内容的，即DNA—RNA—蛋白质，遗传信息要从DNA—蛋白质还要经过RNA的传递，其中包括携带编码信息的mRNA、负责转运氨基酸的tRNA和构成核糖体的rRNA，这三种RNA都是以DNA为摸板在依赖于DNA的RNA聚合酶的作用下合成的，包括RNA链的起始、延伸、终止以及转录后的加工过程，这一系列过程称为转录。 本章一开始我们先看一个问题？ 为什么生物体将遗传信息的传递中还要经过转录，而不直接从RNA---蛋白质？或者直接从DNA—蛋白质呢？这里涉及到一个进化问题，现在研究认为RNA的起源要比DNA早，也就是说早期的生命体中携带遗传信息的是RNA，但是随着进化这一简单的遗传信息传递方式已经不能适应，于是出现DNA，原因是物种要逐渐保持他的稳定性需要遗传信息的稳定，而RNA显然是不如DNA稳定（从化学结构上比较）；其次是生物体要适应环境，保持物种的稳定首先是要保护核心部分的遗传物质，于是真核生物体内就将核、质分开，翻译在细胞质中进行，转录在细胞核中进行，这样的分工对于遗传物质的稳定是非常关键的。 * * * 转录是基因表达的第一阶段，也是控制基因表达的主要的一步。转录是合成RNA的，但是转录不是RNA合成的唯一途径。RNA病毒具有以自身RNA基因 为模板合成RNA的酶，即RNA-------RNA。 转录的过程实现了DNA双螺旋中一条链的RNA链的合成。转录产物RNA的碱基序列与DNA模板链互补，同非模板链一致，只是把T换成了U。因此经常把非模板链称为有义链，模板链称为反义链。 * * * * * 象DNA聚合酶一样，RNA聚合酶在真核和原核生物中也是不一样的。原核生物的RNA聚合酶尤其是 E.coli RNA聚合酶是目前研究最为清楚的RNA聚合酶。 E.coli RNA聚合酶由5个亚基组成α（两个）、β、β’ 、σ，其中σ亚基最为特殊，在酶的组装中， α2ββ’组建好以后σ亚基才结合上去，即α2ββ’+ σ ------- α2ββ’ σ。所以在实验中σ亚基也容易与其他四个亚基分开。于是将α2ββ’ 称