血红蛋白的提取与分离.pptVIP

一、基础知识： ㈠ 凝胶色谱法：P64 1、凝胶色谱法：也称分配色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。 2、凝胶色谱法的原理：P64 在小球体内部有许多贯穿的通道，当相对质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对（ ）的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程（ ），移动速度 ，而（ ）的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在（ ）移动，路程（ ），移动速度（ ），相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。 分子质量较小 较长 较慢 相对分子质量较大 凝胶外部 较短 较快 3、凝胶材料：一些微小多孔的球体（由多糖类化合物构成的，如葡聚糖和琼脂糖）。P64 洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。 混合物 上 柱 洗 脱 大分子流动快 小分子流动慢 收 集 大分子 收 集 小分子 大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快 小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部，路程长，流动慢 1、概念：能够抵制外界酸和碱对溶液PH的影响，维持PH值基本不变的溶液，叫做缓冲溶液。 ㈡ 缓冲溶液：P65 2、缓冲溶液的配制 P65