乙肝两对半标准操作规程POS.docxVIP

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? 乙肝五项(乳胶法)操作规程POS 1.检测目的? 乙型肝炎病毒标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)检测。 ??2.测定原理?? ?HBsAg检测采用双抗体夹心法原理,试剂含有被事先固定于膜上测试区(T区)的抗体。检测时,标本滴入试剂加样处,标本与预包被的乳胶颗粒(即标记物)结合的HBsAb(即标记抗体)反应,该结合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性,乳胶抗体(标记抗体)在层析过程中先与标本中的HBsAg结合,随后结合物会被固定在T区膜上的HBsAb捕获,形成HBsAb标记抗体-HBsAg-HBsAb复合物,从而在T区形成一条红杠。如为阴性,则T区没有红杠。? HBsAb检测采用双抗原夹心法原理,试剂含有事先固定于膜上测试区(T区)的HBsAg。检测时,标本滴入试剂加样处,标本与预包被的乳胶颗粒结合的HBsAg反应(即标记抗原)反应,该结合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性,乳胶抗原(标记抗原)在层析过程中先与标本中的HBsAb结合,随后结合物会被固定在T区膜上的HBsAg捕获,形成HBsAg标记抗原-HBsAb-HBsAg复合物,从而在T区形成一条红杠。如为阴性,则T区没有红杠。? HBeAg检测采用双抗体夹心法原理。试剂含有事先固定于膜上测试区(T区)的HBeAb。检测时,标本滴入试剂加样处,标本与预包被的乳胶颗粒结合的HBeAb反应(即标记抗体)反应,该结合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性,乳胶抗体(标记抗体)在层析过程中先与标本中的HBeAg结合,随后结合物会被固定在T区膜上的HBeAb捕获,形成HBeAb标记抗原-HBeAg-HBeAb复合物,从而在T区形成一条红杠。如为阴性,则T区没有红杠。??????HBeAg、HBcAb采用竞争抑制法原理,试剂含有事先固定于膜上测试区(T区)的抗体。检测时,标本滴入试剂加样处,随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体,则同膜上测试区(T)的单克隆抗体竞争,与预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。如标本中没有相应的抗体,则预包被在乳胶颗粒上的相应抗原与膜上测试区(T)?的单克隆抗体全部结合。??阳性标本,测试区(T)将没有红色条带;阴性标本,测试区(T)会出现明显的红色条带。 3.标本采集? 样本采集后应尽快分离血清或血浆以避免溶血。检测进应尽量使用新鲜的样本。样本若不能及时送检,可在2-8℃冷藏3天。长期保存需冷冻于-20℃,忌反复冻融。发臭、溶血等异常样本请勿使用。 ?4.试剂? 艾博生物医药有限公司 ?5.操作步骤?? 5.1?使用前将试剂板和血清/血浆标本恢复至室温?(20~30%)。从原包装铝箔袋中取出试剂盒(注意:在扣开铝箔前应先恢复至室温),在1小时内应尽快地使用。? 5.2将试剂盒置于干净平坦的台面上,用吸管吸取血清/血浆标本,逐滴垂直加入于试剂板的?五个加样子?L中(每孔2-3?滴)。? 5.3加样后立刻开始计时,等待红色条带的出现,在?15?分钟时读取测试结果。在?20?分钟后读?取的结果无效。? 6.结果判定?? 由于前三个项目?HBsAg、HBsAb、HBeAg?使用双抗体(原)夹心法原理,后两个项日HBeAb、HbcAb?使用竞争法原理。因此前一:个项日与后两个项目判读方法是不同的,请注意区别。? ?6.l.?HBsAg、HBsAb、HbeAg?? 6.1.1阳性(+):?两条红色条带出现。一条于测试区(T)内,另一条位于质控区(C)。阳性结果表明:?标本中含有待测物质。? 6.1.2阴性(-):质控区(c)出现一条红色条带,在测试区(T)内无红色条带出现。?阴性结果表明:?标本中检测不出待测物质。? 6.1.3无效:质控区(c)未出现红色条带,表明不正确的操作过程或试剂盒已经变质损坏。在?此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的试剂盒重新测试。如果问题仍然存在,应立即停止使用此批号产品,并与当地供应商联系。? 6.1.4注意:在进行?HBsAg、HBsAb、HbeAg?测试时,测试区(T)内的红色条带可显现出颜色深浅?的现象。只要在规定的观察时间内,不论该条带颜色深浅,即使只有非常弱的色带也应? 该判为阳性结果。? 6.2.HBeAb、HBcAb?? 6.2.1阳性(+):仅质控区(C)出现一条红色条带.在测试区(T)内无红色条带出现。阳性结果表明:标本中含有待测物质。? 6.2.2弱阳性(+):质控区(C)出现一条红色条带,在测试区(T)内有非常弱的红色条带出现。阳性结果表明:标本中含有待测物质。?? 6.2.3阴性(-):两条红色条带出现。一条于测试区(T)内,另一条位于质控区(C)。阴性结果表明:标本中检测不出待测物质。?? 6.2.4无效:质控区(C)未出现红色条带,表明不正确的操作过程或试剂盒

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