规律运动对Nmnat基因差异表达中老龄果蝇心脏功能的影响-运动人体科学专业论文.docxVIP

分类号—— 分类号—— 密级—— 学校代码 !Q曼璺2 学号 至Q!窒Q至】§】2盟 规律运动对Nmnat基因差异表达中老龄果 蝇心脏功能的影响 Effects of Regu I a r Exe r c i se on Ca r d i ac Funct i on of Late M i dd I e Drosoph i I a w j th Nmnat 6ene D i ffe r ent i a I Exp r es s i on 研究 生姓名 夏晓璇 指导教师姓名、职称 郑澜教授 学 科 专 业 运动人体科学 研 究 方 向 心血管运动适应 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一五年三月 万方数据 摘 摘 要 1研究目的：研究生命早期实施运动干预对心脏Nrnnat基因RNAi、 过量表达和定点突变中老龄果蝇心脏收缩功能、心脏节律、运动能力 和生命周期的影响，探讨Nmnat的运动抗心脏衰老功能。 2研究方法：WmS、NMNAT-RNAi(v107262)、NMNAT-HA(39702)、 NMNAT-WR(39700)和NMNAT-H30A(39701)处女蝇分别与 Hand．Gal4雄蝇杂交，收集F 1代Hand—Gal4／+(nmnat基因正常表达 果蝇)，Handnmnat RNAi(nmnat基因敲减果蝇)，Handnmnat-HA (nmnat基因过表达果蝇)，Handnmnat．WR和Handnmnat-H30A (nmnat基因突变果蝇)处女蝇，随机分为：Hand-Gal4／+．C、 Hand-Gal4／+-E、Handnmnat RNAi．C、Handnmnat RNAi．E、 Handnmnat-HA．C、Handnmnat-HA-E、Handnmnat-WR-C、 Handnmnat-吼E、Handnmnat-H30A-C、Handnmnat-H30A-E，每 组400只，每管20只，25。C恒温、50％恒湿、12小时昼／夜交替光照 饲养。 各运动组(E组)果蝇采用翻转运动，运动装置电机转速为o．5 r／S， 于羽化后第2天实行连续3周，每周5d，每天2．5h翻转运动。运动 装置从初始状态开始，以转轴为中心逆时针转动180L停留 16s——顺时针转动1800——停留16s，依此重复翻转诱导果蝇运动， 训练时间为9：00．1 1：30。 通过qRT-PCR技术检测7天龄Hand．Gal4／+．C组， 万方数据 Handnmnat-WR-C组，Handnmnat-H30A—C组，Handnmnat-HA．C Handnmnat-WR-C组，Handnmnat-H30A—C组，Handnmnat-HA．C 组，Handnmnat RNAi．C组果蝇心脏Nnmat基因mRNA表达水平； 应用M-mode心动图检测3周运动后(21天龄)和运动结束休息2 周后(35天龄)果蝇心脏功能；采用攀爬指数评定于1周运动后次 日及以后每周的第7天(直至7周龄)果蝇运动能力；各组于羽化后 第1天随机取果蝇200只，相同条件饲养，培养基两天更换一次，同 时记录果蝇死亡数，绘制存活曲线图，计算中位生存期。 3研究结果 3．1果蝇心脏Nmnat基因mRNA表达检测结果 与Hand GIa4／+-C组相比，Handnmnat RNAi—C组、 Handnmnat-HA．C组果蝇心脏Nmnat的相对表达量分别约有50％的 下降和42％的上升(P0．001，P0．01)：Handnmnat-WR-C组和 Handnmnat-H30A-C组表达高于Hand Gla4／+．C组， 其中 Handnmnat-H30A—C组有显著性差异(P0．05)。 3．2果蝇心脏功能的M-mode心动图检测结果 (1)3周龄果蝇心脏功能的M-mode心动图检测结果 与Hand Gla4／+组相比，相同干预条件Handnmnat RNAi组FS 下降(PO．001)，DD、SD增加(P0．001)；Handnmnat HA组、 Hand：nmnat WR组、Handnmnat H30A组较相同干预条件Hand nmnat RNAi组FS增加(PO．001)；与Handnnmat RNAi．C组相比， Hand：nmnat WR-C组SIAI下降(P0．01)。与Hand：nmnat对临i．C 组相比，Handnmnat RNAi—E组果蝇FS增加(P0．05)；Hand II 万方数据 Gla4／+一E组、Handnmnat Gla4／+一E组、Handnmnat HA—E组、Handnmnat WR-E组和Hand nmnat H30A—E组较相同遗传背景C组FS增加(P0．05)；Hand nmn