角质形成细胞和黑素细胞体外共培养的试验研究-海南医学.PDF

海南医学2013年11月第24卷第21期 doi:10.3969/j.issn.1003-6350.2013.21.1305 ·论 著· 角质形成细胞和黑素细胞体外共培养的实验研究 1 2 龚 石 ，张 晴 （1.海南省皮肤病医院皮肤科，海南 海口 570206； 2.贵阳医学院药理教研室，贵州 贵阳 550004） 【摘要】 目的 利用两种不同培养方案，探讨正常人角质形成细胞和黑素细胞的体外共同培养方法。方法 采 用无血清培养液和微量血清培养液分别进行人角质形成细胞和黑素细胞纯化培养及用K-SFM 角质形成细胞培 养基开展两种细胞共同培养。结果 K-SFM 角质形成细胞培养基及其添加成分构成的无血清培养基成功进行 角质形成细胞和黑素细胞共同培养。结论 不同培养方案可产生不同体外共同培养结果，可以成功在体外进行 角质形成细胞-黑素细胞共同培养。 【关键词】 角质形成细胞；黑素细胞；共同培养 【中图分类号】R-33 【文献标识码】A 【文章编号】 1003—6350（2013 ）21—3128—03 1 2 Co-cultureofmelanocyte-keratinocytein vitro.GONGShi ,ZHANGQing .1.DepartmentofDermatology,Hainan SkinDiseaseHospital,Haikou570206,Hainan,CHINA;2.DepartmentofPharmacology,GuiyangMedicalCollege, Guiyang550004,Guizhou,CHINA 【Abstract】 Objective To study melanocyte-keratinocyte co-culture invitro by two different methods. Methods Keratinocytes and melanocytes were cultured from free serum medium, and coculture was performed ap- plying K-SFM free serum medium. Results In K-SFM free serum medium, keratinocytes and melanocytes was co-cultured successfully. Conclusion Different cell culture medium designs give rise to different results, which can all successfully culture keratinocyte-melanocyte invitro. 【Keywords】 Keratinocytes; Melanocytes; Co-culture 体外成功培养人角质形成细胞(Keratinocytes ， 1.1.2 试剂和仪器 M254 及添加成分(Cascade ， KC)可发生类似于原位表皮的增殖、分化、分层，形成 USA) ，K-SFM 角阮细胞培养基及其添加成分(GIB- 连续完整的表皮类似物。正常人原位表皮中除有大 CO) ，S-100 (Dako)。Dispase Ⅱ酶、低糖型DMEM 培 量KC 外，还存在一定数量黑素细胞(Melanocytes ， 养基、谷氨酰胺、胰蛋白酶均购自Sigma 公司，胎牛血 MC) ，体外表皮重建只有引入黑素细胞，构成类似原 清(FB