光合细菌生物制氢-微生物学专业论文.docxVIP

使选育的菌株实用性更强裤文选用有机废水主要降解产物一乙酸为唯一 使选育的菌株实用性更强裤文选用有机废水主要降解产物一乙酸为唯一 氢供体，利用3种不同营养类型的选择培养基(紫色非硫细菌、紫色硫细 菌和绿硫细菌培养基)，分别从不同水域环境取样进行了产氢光合细菌的 筛选。(从影响太阳能转化效率主要因素出发，本文在对分离纯化的15株 光合细菌形态学研究基础上、着重进行了最适生长温度、光合色素、有机 物和硫化物利用及耐盐能力的测定。在对每组细菌初筛基础上，本文对选 育出的8个菌株进行了生长动力学测定，其中Z、SP2、R3、Y7菌株能利 用乙酸快速生长。对其产氢动力学研究表明，它们均具有较高光合放氢活 性，产氢得率分别为308．9 mL．g～、272．4 mL．g～、256．1 mL．g～、235．8 m L．百1，其中Z菌株产氢量最高。这些菌株均生长迅速、能广泛利用多 种有机物、色素组成齐全且含量高，对太阳光谱有宽的响应范围，这种特 性在降解有机物转化太阳能为氢能技术中具有较高实用价值。 ·传统观点认为，谷氨酸仅是作为产氢合适氮源被提供，而不是作为 供氢体被利用。究竟谷氨酸在产氢过程中扮演何角色?乙酸又是如何被吸 收?引起产氢停止的最主要原因是什么?{本文分别以乙酸、谷氨酸、乙酸 和谷氨酸为产氢体系，研究了z菌株(鉴定为沼泽红假单胞菌， Rhodopseudomonaspalustris)和一株红杆菌(Rhodobacter sp．)的光合放 氢、细胞生长和基质利用动力学等。跆果表明，在仅含有乙酸为唯一氢供 体体系中，两菌株均表现出高产氮活性，但细胞生长不良。在仅含有谷氨 酸为唯一氢供体或氮源体系中，两菌株产氢活性微弱，但细胞生长良好。 在同时含有乙酸和谷氨酸反应体系中，ep．palustris Z菌株产氢活性等同 于仅含有乙酸反应体系，谷氨酸消耗较快；而Rhodobacter sp．菌株产氢得 率仅有乙酸体系的30％左右，谷氨酸利用率为80％。但两菌株细胞生长均 优于谷氨酸产氢体系。该结果表明，光合细菌光合放氢的主要供氢体是乙 酸而不是谷氨酸，谷氨酸对细胞生长起重要作用，基本上不能用于产氨。 分析两菌株细胞生长、乙酸消耗和pH变化规律，推断的结论是供氢体乙 山东大学博士学位论文酸是以HAc分子形式进入细胞，pH的上升是引起产氢速率下降和基质消 山东大学博士学位论文 酸是以HAc分子形式进入细胞，pH的上升是引起产氢速率下降和基质消 耗速率下降的最关键因素。j | ·以沼泽红假单胞菌(却．pa／ustr／s)Z菌株为研究对象，首先进 行了产氢最适供氢体研究。在此基础上，探求了生长和产氢的关系， 并着重进行了种子培养基、菌龄、接种量、供氢体数量、氮源数量、 光照强度和温度对产氢的影响研究。【结果表明：苹果酸、琥珀酸、丙 酮酸是该菌株生长的良好碳源，但相对乙酸而言，其产氢速率较低； 当种子来源于生长培养基(GM)时，产氢一般滞后于生长；种子培养 基和菌龄对产氢效率和产氢延滞期有显著影响。来自GM高菌龄和来 自产氢培养基(HM)对数期的预培养物，可显著提高产氢活性和总产 氢量：生物量越高，产氢量越高，产氢延滞期也明显缩短，但过高的 生物量会对产氢过程产生负效应；供氢体数量和氮源数量是产氢的限 制性影响因素，在10 mm01．L-l~50 mm01．L‘1乙酸钠和5～15 mm01．Ld 范围内，产氢活性随底物浓度的增加而增强。谷氨酸钠浓度高于15 mm01．L。1时，由于游离NH4+的出现，产氢活性受到抑制，但却明显刺 激细胞的生长。在上述条件下，4000 lux～9000 lux的光照强度是光合 放氢适宜范围。在30℃～37(2温度范围内，细胞生长旺盛，产氢量也 逐渐接近峰值，从而表现出生长与产氢温度的一致性。在标准状况下， 该菌株最大产氢速率可达19．4 mL．L～．h～。从经济学角度分析，高温 和高的光照强度条件下的产氢更有利于户外利用太阳光产氢，尤其在 夏季。j ·与光合放氢有关的电子传递载体、固氮酶、氢酶等都需要铁的参与。 镍是组成光合细菌氢酶、CO脱氢酶的重要活性基团。鉴于铁和镍在光合 细菌氢代谢中的作用，本文着重进行了铁、镍以及镁、锰、锌、铜、钼对 沼泽红假单胞菌(j够palustris)z和红杆菌(Rhodobacter sp．)菌株细胞 山东大学博士学位论文生长、光合放氢和光合色素合成的影响研究o／结果表明：高浓度的铁可显 山东大学博士学位论文 生长、光合放氢和光合色素合成的影响研究o／结果表明：高浓度的铁可显 著提高细胞光放氢能力和生物合成能力，最适浓度的铁可使两菌株产氢能 力分别达对照组的1．32倍和2．8倍，产氢得率分别为360．6 mL．go和385．9 mL．g一，生物量分别为对照组的1．42倍和1．5